橘核质量和柠苦素类似物纯化工艺的研究.pdfVIP

摘要 reticulata 橘核为芸香科植物橘Citrus Blanco及其栽培变种的干燥成熟种子， 具有理气，散结，止痛的功效，现代临床主要用于治疗急性乳腺炎、乳腺增生等 疾病，效果显著，其药用价值受到重视。《中国药典》2010年版仅收载了橘核 的“性状”、“横切面鉴别”等项，质量标准尚不完善；研究表明橘核的主要有效组 分为柠檬苦素类似物，该类化合物药理作用明确，具有良好的开发前景，但目前 关于柠檬苦素类似物纯化工艺的研究较少，提取物纯度过低。本课题为进一步完 善橘核药材的质量标准，同时获取高纯度的柠檬苦素类似物，主要对以下几个方 面进行了研究： 1．橘核药材质量研究：①建立了HPLC法同时测定橘核有效成分柠檬苦素、 诺米林含量。②对收集的18批不同产地、不同品种(桠柑、福橘)的橘核样品 进行了柠檬苦素、诺米林的含量测定：建议将柠檬苦素和诺米林收载到橘核质量 标准项下作为“含量测定’’的指标成分，按橘核干燥品计算，橘核药材含柠檬苦素 不得少于0．49％，诺米林不得少于0．28％，完善了橘核药材的质量标准。③首次 对橘核不同炮制品进行了含量测定：炮制后柠檬苦素、诺米林的含量均有所下降， 下降程度由大Nd,的排列顺序依次是盐炙清炒麸炒，完善了橘核饮片的质量 标准。④为探讨不同果期的橘核中柠檬苦素、诺米林的变化规律，课题组对10 月～次年2月的福橘种子中柠檬苦素、诺米林的含量变化进行了监测：随着福橘 果实的不断成熟，10月至12月底期间柠檬苦素和诺米林的含量均有不同程度的 升高，自次年1月开始两者含量开始下降，直至果期结束。⑤对槿柑、福橘的种 子进行显微定量鉴别：福橘和桠柑种子中草酸钙方晶的长径、短径均存在显著性 差异(P0．05)，通过对草酸钙方晶大小的比较可初步区分桠柑和福橘的种间 差异。⑥为更全面的反映橘核药材中所含化学成分的种类和含量，本课题首次对 橘核药材的HPLC指纹图谱进行了研究，完善了橘核药材的质量标准：建立了橘 核药材的HPLC指纹图谱共有模式图，共标定11个共有峰，其中指认4号峰为 橙皮苷，9号峰为柠檬苦素，10号峰为诺米林；同时对18批橘核药材指纹图谱 的相似度进行了评价，相似度均在O．90以上，具有较好的～致性，说明生成的 对照图谱可作为橘核药材的鉴别标准。 2．柠檬苦素类似物纯化工艺研究：①通过静态吸附解吸实验，从16种树脂 中筛选出了最佳树脂，然后针对筛选出的HPD．722型大孔树脂的上样条件(上 样浓度、上样流速、上样pH值)、洗脱条件(洗脱剂浓度、洗脱剂pH值、洗 脱流速、洗脱剂用量)进行了系统的考察，优化后的纯化工艺参数为：上样浓度 在3。50 mg．mL。1～5．50 的蒸馏水溶液清洗；最佳洗脱溶剂为80％乙醇溶液，洗脱流速为2BV／h，洗脱液 pH值为7，铣脱体积为6BVI②本课题采用最优的纯化工艺可得到较高纯度的 柠檬苦素类似物固形物：柠檬苦素类似物含量可达80％以上，柠檬苦素含量20％ 以上，诺米林含量40％以上；对固形物中大孔树脂各物质的残留量进行了检测， 结果表明各物质的残留量均符合《中国药典》2010年版二部附录Ⅷ中限量要求， 为进一步应用柠檬苦素类似物奠定了基础一 本课题通过以上的研究为橘核药材质量控制提供了理论依据，同时制备高纯 度柠檬苦素类似物提取物，为中药现代化发展奠定了基础。 关键词：橘核；柠檬苦素；诺米林；质量研究；纯化；柠檬苦素类似物 Abstract Seedis matureseedofC／trusreticulataBlancoandthevariation Tangerinedry ofit．The of Seedare the and efficacyTangerine regulatingqi，eliminatinglump thetreatment+ofacute relieving mastitis，mammaryglandhyperplasia,the pa斌for effectof Seedis medicinal at Tangerinesign