感染性疾病病原体快速诊断.ppt

Wenen LIU 感染性疾病病原体快速诊断 概 述 感染性疾病：由某种病原体所致，通过不同方式引起人体发生感染并出现临床症状的疾病,主要表现为发热。 病原体：细菌（含TB）、支原体、衣原体 病毒 真菌 原虫等 感染的诊断依据 临床表现：感染的全身中毒症状： 畏寒、发热、皮疹等 实验室常规检查：血常规：WBC、DC 影像学检查：X-RAY、B超 病原学检查：染色、培养 血清学检查：抗原或抗体检测 感染的分类 按病原学分类 细菌感染（包括结核） 真菌感染 病毒感染 支原体、衣原体 按部位分类 局部感染 全身感染 临床希望第一时间知道的信息 感染或非感染 细菌感染或非细菌感染 是结核感染或普通细菌感染 酵母样真菌感染或丝状真菌感染 白色假丝酵母或其他念珠菌感染 曲菌感染或毛霉菌感染 因为上述感染治疗方法不同 感染标志物 细菌感染标志物 白细胞计数与分类 血沉 C-反应蛋白（CRP） 白介素-6 降钙素元 内毒素 真菌感染标志物:G试验、GM试验 结核感染证据：夹层杯、T-SPOT 临床常见细菌感染快速诊断技术 降钙素原(Procalcitonin PCT) 降钙素原是正常人血清中存在的含116个氨基酸组成的糖蛋白，最初由甲状腺细胞产生，血清水平很低。 在非感染或病毒性感染疾病时保持非常低的血清水平，在细菌性感染时含量升高，并与感染程度和预后呈正相关。 PCT含量的变化稳定，并出现在疾病的早期（3-4h）。短半衰期(24h) 国外把 PCT作为最敏感的感染标志。 正常血清水平:100-150pg/ml 降钙素原 PCT : 分子结构 细菌感染后PCT快速升高 Kinetics of procalcitonin in iatrogenic sepsis Brunkhorst F.M et al, Intens Care Med 1998,24:888-892 PCT来源 Left Lane:正常组, 在不存在感染的情况下，甲状腺外CALCI表达被抑制，而主要局限于甲状腺和肺的神经内分泌细胞有一定程度的表达 Right Lane: 脓毒症组,在细菌感染时可诱导全身各种组织多种类型细胞CALCI表达和PCT连续性释放 PCT动力学 2-3h开始增加； 6-8h快速升高； 12h-48到达峰值； 2-3d 正常 血浆浓度在＜0.05ng/ml-1000ng/ml 半衰为15-20h左右,且不受肾功能影响 PCT检测方法 快速半定量法（PCT-Q） 全自动快速定量法（VIDAS) 快速半定量法（PCT-Q） 全自动快速定量法 仪器：法国梅里埃公司VIDAS全自动酶联荧光分析仪及配套试剂 标本要求：静脉抗凝血 注意无菌操作，使用新鲜标本，如果4小时内不使用，应将标本放置-20℃保存。 血浆中的PCT非常稳定，收集标本24h后，PCT浓度在室温下大约下降12％，在4℃大约下降6％ PCT用于细菌感染和脓毒症诊断是一种非常有价值的标志物 细菌感染/脓毒症诊断及严重程度判断 脓毒症治疗效果监测及预后评估 抗生素的有效管理 细菌感染诊断及严重程度判断 抗生素有效管理 PCT的临床应用 急诊 住院病房 外科手术 血液科 内科ICU 外科ICU 儿科急诊 儿科病房 儿科ICU 新生儿科 严重细菌感染或脓毒症的检测（鉴别诊断） 疾病或治疗反应的监测 局部与全身性感染 脓毒症的诊断和监测 新生儿脓毒症的检测 对PCT检测的影响 受以下因素影响 * 甲状腺功能 是功能性甲状腺髓样癌的肿瘤标志物 * 肾功能 严重肾功能受损者中水平较高 不受以下因素影响 * 类固醇药物 * 自身免疫性疾病 * 年龄、性別 * 免疫功能低下状态:肝硬化、HIV感染 细菌内毒素 细菌内毒素检测 仪器和试剂 BET-24A细菌内毒素分析仪 MB-80微生物快速动态监测系统 标本要求 患者早上尚未进行药物静脉治疗时: MB-80：“无热源真空采血管”,静脉抗凝血 ，采血量2-4ml ，30min内送检 BET-24A：抽取1mL静脉抗凝血，配1mL1号处理液 其它体液如脑脊液﹑胸腹水与血标本要求相同。 注意无菌操作 内毒素活性定量检测意义 G-所致脓毒症早期鉴别诊断 指导抗生素正确使用 判定抗感染治疗效果 帮助判断患者的预后 内毒素定量检测的适应症 各种急、慢性病理性发热患者 各种类型“中重度感染、肝病、休克、肠道疾病、脏器功能衰竭、大手术术后”患者 慢性疾病长期卧床、免疫力低下患者 急诊及ICU病房收治的生命体征不稳定的患者 结核分枝杆菌的快速诊断 是引起结核病的病原菌。它可侵犯全身各器官，