组织培养解答.ppt

3.3 培养基成份 WT、MS＋植物激素 3.3.1 生长素＋细胞分裂素合理搭配，效果更好 一般植物 均适宜 3.3.2 特殊种类激素 如: 大麦＋2,4-D 猕猴桃＋玉米素 3.3.3 无特别要求，任何一种生长素均可 如:枣 3.悬浮培养中细胞生长量的计算（细胞计数法、细胞密实体积、细胞鲜重、细胞干重 是通过这四种方法来计算吗？ 是的！ 第三章 离体无性繁殖 离体无性繁殖的五个阶段 一、培养物的建立 二、诱导外植体的生长与分化 三、促进中间繁殖体的增殖 四、壮苗与生根 五、驯化炼苗 一、培养物的建立 外植体的选择与灭菌 外植体的接种 外植体的培养 二、诱导外植体的生长与分化 1.顶芽和腋芽的发育：指从顶芽或腋芽中萌发的单苗或多个苗。 采用外源的细胞分裂素，促使具有顶芽或没有顶芽的休眠侧芽启动生长，形成一个微型的多枝多芽的小灌木丛状的结构。在几个月内，可以将这种丛生苗的一个枝条转接继代，重复芽—苗增殖的培养，从而迅速获得无数的嫩茎。 2.不定芽发育 2.1外植体的脱分化 （去）脱分化（dedifferentiation）在组织培养中，受伤的植物树料周围细胞又可旺盛地进行分裂，产生Callus。这种原已分化，并有一定功能的体细胞（性Cell）丧失了原有的形态和机能，又回复到没有分化能力的无组织的状态。这个过程就是组织培养的去（脱）发化过程。一经去分化该材料又具有了分化的全能性能力。 2.2再分化（redifferentiation）及方式（54页）再分化：在植物组织培养中形成的处于去分化状态的Callus，是一均匀一致的细胞集团，经继代培养可能产生分化现象。这是原分化状态的细胞经去分化后，经过培养后的再次分化，称作再分化。 再分化的方式：1.体细胞胚 2.茎、芽，形成植株 二者区别 胚状体能形成植株，而不定芽也能形成植株，二者有什么区别呢？ ①起源 胚状体：形成的初级阶段，多来自单个Cell，很早就具有明显的根端与菌端的两极性结构，不需诱导生根直接形成植株。 不定芽：最初是由分生细胞团形成单极性的生长点，发育为芽，再转移至生根介质中，诱导形成根，然后才能形成完整的植株。 ②与周围Cell的联系不同 胚：由胚状体发育成的小植株与周围Callus母体组织块几乎没什么结构性联系；小植株是独立的，易于分离。 不定芽：不定芽与母体组织和Callus之间有着较紧密的联接，包括一些维管束组织，皮层，无表皮组织等，因而不易分离。 3胚状体发生61页 胚状体（embryoid）的分化，也叫体细胞胚（somatic embryo）。以胡萝卜（cowed）为试材（模式植物）。 1）概念及例子 2) 体胚的发生方式64页 3）影响体胚发生的因子65页 4）体胚的实际应用74页 人工种子就是将组织培养产生的体细胞胚包裹在能提供养分的胶囊里，再在胶囊外包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜，在适宜的条件下能发芽出苗的一种类似于种子的结构。 ? 4.原球茎(protocorm)的发育 在兰科或部分球根植物培养中应用较多。原球茎最初是兰花种子发芽过程中的一种形态学构造，种子萌发初期并不出现胚根，只是胚逐渐膨大，以后种皮的一端破裂，胀大的胚呈小圆锥状，称做原球茎。常从茎尖、种子或侧芽的培养中产生一些原球茎，原球茎本身可以增殖，也可萌发成小植株。 ①培养部位：多数植物根、茎、叶和花器官各个部位都有培养成功的报道。 a 新芽的茎尖部，是细胞分裂最旺盛的地方，也是成功率最高的部位，但分离较难，且破坏植株整体。b 茎的隐芽，花茎和花梗的隐芽、新叶。 ②培养基的选择，对于兰科花卉的培养，基本培养基的选择和植物生长调节剂的配比组合均非常重要。常用的基本培养基有：Kc Vw White MS B5等，种类不同，选择不同，可查资料。生长调节剂的配比，同样是种属不同，配比不同，需查文献和实验。③组织褐变 ④原球茎的增殖和器官形成将初代培养获得的原球茎，分离或个体转入新鲜培养基。培养基：基本培养基依照种属不同而异，低浓度的CTK，液体培养基抑制芽分化，可固液交替使用。一般增殖后的原球茎瓶内有三种状态芽→生根or状苗原球茎→增殖Callus→增殖兰花是历史上的第一件 三、促进中间繁殖体的增殖 2.3.1 中间繁殖体的增殖方式 不同的植物种类，其生长分化的形态及特点不同，中间繁殖体的增殖方式也有所区别。概括起来主要有如下几种。 1）多节茎段方式 单轴茎段方式与植物的扦插方式相同，只是前者在无菌条件下，后者在自然条下；前者的基质是培养基，后者的基质是土壤或其他