大肠埃希菌热敏性肠毒素B亚基研究进展.pdfVIP

动物医学进展，2008，29(2)：68—72 Progress in Veterinary Medicine 大肠埃希菌热敏性肠毒素B亚基研究进展 唐思静 ，刘惠莉 (1．新疆石河子大学动物科技学院，新疆石河子 832003；2．上海市农业科学院畜牧兽医研究所，上海 201106) 摘 要：产肠毒素大肠埃希茵(EnterotoXigenic E．coil，ETEC)是引起幼畜、婴幼儿及旅游者腹泻的重 要病原之一。ETEC产生两类肠毒素，一种是对热敏感的热敏性肠毒素(heat—labile enterotoxin，LT)，另一 种是对热不敏感的耐热性肠毒素(heat—stable enterotoxin，ST)。LT不仅是ETEC主要的毒力因子，而且 还是一种重要的黏膜佐剂，它由A、B亚基组成，由于LT A具有毒性作用，限制了LT作为黏膜免疫佐剂的 应用；而LT B无毒且具有黏膜佐剂活性，使其成为备受关注的佐剂之一。近年来对LT B的结构、介导的免 疫调节分子机制、突变体及其佐剂作用已进行了较为深入的研究，为充分利用LT B的黏膜免疫佐剂功能奠 定了基础。 关键词：大肠埃希茵热敏性肠毒素B亚基；免疫机制；免疫原性；佐剂作用 中图分类号：$852．612 文献标识码：A 文章编号：i007—5038(2008)02—0068—05 大多数通过黏膜途径免疫的可溶性蛋白免疫原 会被解聚成单体(LT B1)，在适当的中性缓冲液中 性都很弱，而且通过口服或滴鼻免疫还可能引起特 又能重聚。体外模型试验发现单克隆抗体与LT B1 异性免疫耐受，因此，在黏膜免疫中使用合适的佐剂 以1：1的比例混合，有5O 的LT B1能重聚 。如 成为提高免疫原性和降低免疫耐受的主要手段。生 果以2：1的比例混合只有1O 能重聚[5]。Chees— 物佐剂种类很多，大肠埃希菌热敏性肠毒素是比较 man C等[6]研究发现，解聚的LT B在KC1一HC1缓 有发展前景的佐剂之一。LT为产肠毒性大肠埃希 冲液中孵育，有8O 的单体被重聚。在酸性条件 菌分泌到胞周质的一种热不稳定外毒素，是由具有 下，随着孵育时间的延长，重聚的单体B亚基将会减 ADP一核糖基转移酶活性的A亚单位以及与神经节 少到2O 。同时也表明，在解聚的条件下，离子类 苷脂结合的B亚单位组成的AB5型六聚体蛋白，A 型对B亚基的重聚有很大的影响。LT B1氨基端的 亚基是其毒性主要单位，B亚基具有免疫原性和佐 十肽与单抗LDS47有很高的特异性，单抗LDS16 剂功能。LT不仅具有免疫原性，而且是一种有效的 对LT B也有极强的特异性结合能力，因此推断出 黏膜佐剂，能明显增强机体针对共免疫抗原的IgA 氨基端的十肽区域(APQSITELCS)对 B亚基五聚 和IgG反应，同时还能消除机体对这些共免疫抗原 体的形成和稳定很关键[7]。LT操纵子含有2个基 的耐受性，诱发针对它们的长期记忆，因此LT作为 因，编码 A亚基的toxA和编码 B亚基的toxB基 黏膜佐剂得到了广泛关注。LT作为佐剂的方式有 因，它们串连在一起被转录成一条mRNA链。toxB 两种，一种是通过改变毒力位点氨基酸以降低LT A 基因始于toxA基因3 末端，toxB编码区全长 372 亚基毒性，另一种是单独使用B亚基作为佐剂，以避 bp，编码由124个氨基酸组成的肽链。toxB在起始 免A亚基的毒性作用[1-3]。 密码子前3个核苷酸处有SD序列，其中5个核苷酸 1 LT B的结构 可与16 S核糖体 RNA 3 端12个核苷酸中的5个 LT B是由5个分子质量为l1．5 ku的B亚基 互补，且近ATG端碱基为A。这些结构有助于提高 单体组成，每个单体与相邻2个单体形成近3O个氢 核糖体的结合效率，且toxB mRNA的二级结构也 键及6个盐桥[4]。这一结构特点使得它在强酸或强 有助于toxB的翻译，从而导致在1个启动子下游， 碱(p