蛋黄卵磷脂的制备.pptx

项目三：蛋黄卵磷脂的制备 姓名：朱 鹏 飞 学号：2012040941 组别： 7 组 班级：生物技术1211;目录： 一、蛋黄卵磷脂的相关知识 二、蛋黄卵磷脂的制备 三、蛋黄卵磷脂的检测 四、卵磷脂在生活中的价值与应用;一、蛋黄卵磷脂的相关知识 磷脂最早是由Uauquelin于1812年从人脑中发现，Golbley于1844年从蛋黄中分离出来，并于1850年按照希腊文lekithos（蛋黄）命名为Lecithin（卵磷脂）,所以又称为蛋黄素，并以希腊文命名为Lecithos（卵磷脂）。 卵磷脂属于一种混合物，是存在于动植物组织以及卵黄之中的一组黄褐色的油脂性物质，卵磷脂是生物膜的重要组分,其构成成分包括磷酸、胆碱、脂肪酸、甘油、糖脂、甘油三酸酯以及磷脂。卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。 蛋黄、牛奶、动物的脑、骨髓、心脏、肺脏、肝脏、肾脏以及大豆和酵母中都含有卵磷脂。其中又以蛋黄、大豆和动物肝脏的含量最高，鸡蛋中的卵磷脂品质最高，但是难以提取，这使得其价格堪与黄金相媲美。 ;二、蛋黄卵磷脂的制备 制取蛋黄卵磷脂的方法有很多，有有机溶剂法，无机盐复合沉淀法，乙酸乙酯纯化法，超临界CO2萃取法等，这里着重介绍有机溶剂法 1、实验原理 有机溶剂法是根据蛋黄中各组分在溶剂中的溶解度不同而进行分离的。 室温下,取10mL新鲜蛋黄用两倍体积的乙醇进行提取,混合搅拌,离心(3000r/min)5min,将沉淀物重复抽提几次后,取上清液,60℃蒸馏至近干,加入丙酮,分离沉淀物,真空干燥30min,得到淡黄色粗制卵磷脂,称重. ;2、实验流程 ;3、原料、试剂、器材与仪器 原料：熟鸡蛋一个 试剂：95%乙醇溶液、丙酮溶液、乙醚 器材与仪器：烧杯、研钵、布氏漏斗、玻璃棒、量杯、真空干燥箱、电炉、蒸发皿 ;4、操作步骤 （1）取熟鸡蛋一只，于研钵中研细，先加入10ml95%乙醇研磨，充分研磨一段时间后，再加入10ml95%乙醇，继续研磨 （2）将研磨液进行抽滤，滤渣再次移入研钵加入10ml95%乙醇研磨，抽滤后合并二次滤液 （3）将蒸发皿置于沸水浴中，蒸去乙醇至干，得到黄色油状物 （4）冷却后，加入5ml 氯仿，搅拌后使油状物完全溶解，移入离心管 （5）在搅拌下慢慢加入15ml丙酮，即有卵磷脂析出，搅动使其尽量析出 （6）离心（取沉淀） ;三、蛋黄卵磷脂的检测 检测卵磷脂的方法有检测水解产物、薄层层析法、和紫外光吸收光谱法，这里重要介绍检测水解产物和薄层层析法 1、检测水解产物法 检测原理：卵磷脂可在碱性溶液中加热水解，得到甘油、脂肪酸、膦酸和胆酸。 （1）水解：在卵磷脂中加入20%氢氧化钠溶液并在沸水浴中水解，冷却过滤，得到白色沉淀。 （2）脂肪酸的检测：沉淀中加入水，并加入硝酸后用胶头滴管加入两滴10%醋酸铅，观察清液变浑浊，液体中有絮状物出现 （3）甘油的检测：取一支试管，加入1%CuSO4 1滴于试管中，滴加2滴20%NaOH溶液，振摇，溶液呈蓝色，有些许絮状物，加入1mL水解液，振摇，溶液稍许浑浊，颜色变深。 （4）胆碱的检查：加入1mL水解液于试管中，滴加硫酸酸化，以pH试纸试之，加入1滴碘化铋钾溶液，观察得溶液呈淡黄色且有絮状物。 ;2、薄层层析法 含义：薄层层析是将吸附剂或者支持剂（有时加入固化剂）均匀地铺在一块玻璃上，形成薄层。把欲分离的样品点在薄层上，然后用适宜的溶剂展开，使混合物得以分离的方法。由于层析在薄层上进行故而得名。 （1）制板 称取20 g 孔径为6 nm 的硅胶60, 用45mL 1- 1mol?L 的碳酸钠溶液稀释, 置于研钵中研磨, 调成均匀的糊状物, 涂布器将糊状物均匀地铺在玻璃板上, 铺完后于室温下风干, 使用前在110 ℃烘箱中活化。 （2）点样 用毛细管在层析板距下端2. 5 cm 处点两个样,自制卵磷脂样品和标准品, 样点的间距为3 cm。;（3）展开 将展开剂置于层析缸中平衡30m in, 使溶剂的蒸汽压在层析缸中达到平衡, 然后放入层析板, 溶液自下而上在层析板上展开, 上升速度约6 cm/h 当展开到层析板高度的3/4 处即可取出, 置室温下干燥。 （4）显色 将显色剂均匀地喷雾在层析板上, 可立即看到有蓝色斑点出现;四、卵磷脂在生活中的价值与应用 目前市场上的卵磷脂多是从大豆中提取，工业用卵磷脂的剂型主要有：液体、颗粒、粉末三种，液体浓度在70%左右，颗粒及粉末可达95%以上。卵磷脂软胶囊是以液体卵磷脂为原料加入甘油或大豆油稀释后，用明胶包裹而成，有效成分含量低一般少于60%，价格较低，是大部分品牌卵磷脂采用