胞磷胆碱对偏头痛模型大鼠三叉神经节中TRPM8表达影响的探究.pdfVIP

目 录 l 胞磷胆碱对偏头痛模型大鼠三叉神经节中TRPM8表达影响的 研究……………………………………………………………l 1．1 中文摘要………………………………………………………1 1．2 英文摘要………………………………………………………4 1．3 前言……………………………………………………………7 1．4 材料与方法……………………………………………………12 1．5 结果……………………………………………………………21 1．6 讨论……………………………………………………………29 1．7 结论……………………………………………………………34 1．8 参考文献………………………………………………………35 1．9 英汉缩略词对照表……………………………………………39 2 致谢……………………………………………………………40 3 硝酸甘油偏头痛模型大鼠三叉神经节离子通道受体蛋白 TRPM8表达的研究(综述)…………………………………41 Y2601959 胞磷胆碱对偏头痛模型大鼠三叉神经节中TRPM8表达影响的研究 捅 要 目的：通过建立硝酸甘油偏头痛大鼠模型，并对其进行预防性的药物(氟桂 利嗪、胞磷胆碱、联合用药)干预，留取颅底三叉神经组织，观察各组大鼠三 激活参与偏头痛发作机制，也为临床使用胞磷胆碱预防性治疗偏头痛提供理论 和实验依据。 硝酸甘油(NTG，10 mg／kg)，每周注射一次，并进行行为学评分；随后，再将 模型组大鼠按之前分组方法随机分为4组，分别为模型对照组(n=10，灌胃注 射NS 从第二周第一天开始，每只大鼠每周仍一次颈部皮下注射硝酸甘油，并同时每 天给予不同药物灌胃，第5周颈部皮下注射硝酸甘油，分别灌药，4小时后，用 10％水合氯醛麻醉，心脏灌注，开颅取颅底三叉神经节，一部分用4％多聚甲醛 固定并处于4℃保存：(1)采用HE染色法对三叉神经组织进行染色，观察三叉 在各组偏头痛大鼠三叉神经节中的表达变化；(3)另外一部分三叉神经节在液 氮中保存：采用Wrestemblot检测TRPM8受体蛋白的表达变化。 结果：每周每只大鼠行为学评分结果提示：模型对照组与空白对照组比较， 大鼠模型；通过预防性药物治疗后，氟桂利嗪组，胞磷胆碱组，联合组与模型 对照组比较，差异有统计学意义(PO．01)，提示各药物对大鼠行为均存在影 响。胞磷胆碱组与氟桂利嗪组，差异有统计学意义(PO．01)，提示胞磷胆碱减 轻大鼠行为学表现效果优于氟桂利嗪；联合组与氟桂利嗪组、胞磷胆碱组比较， 差异有统计学意义(P0。01)，联合用药预防控制偏头痛大鼠的行为表现优于 单独药物干预。三叉神经节HE染色提示：模型组与空白对照组三叉神经节结 构一致，进而说明偏头痛的发生可能不影响三叉神经节的结构变化，只发生了 功能性紊乱；谷氨酸受体免疫组织化学(SP法)显示：模型对照组中的谷氨酸 受体呈强阳性表达，明显高于空白对照组，氟桂利嗪组呈阳性，胞磷胆碱组呈 弱阳性，联合组几乎是阴性表达，其OD值的单因素方差分析结果显示：谷氨 利嗪组稍下降，胞磷胆碱组比氟桂利嗪组下调幅度大，以联合组下调幅度最为 显著，其灰度值经单因素的方差分析提示TRPM8在每个组别中的表达差异有 T砌，M8表达增加，评分升高，临床症状越严重，应用胞磷胆碱预防干预后， 低，症状减轻，提示胞磷胆碱有预防治疗偏头痛的作用。从模型对照组中谷氨 1，差异有 统计学意义，提示谷氨酸受体与TRPM8表达呈正相关，谷氨酸受体表达升高 可能对TI冲M8蛋白表达有促进协同作用。 结论：(1)偏头痛发作时，三叉神经组织在解剖结构上无明显改变，提示 痛发生机制，并具有协同作用；(3)胞磷胆碱作为一种神经保护药，可预防神 经功能紊乱，保护神经元，在预防偏头痛发作这类神经性疼痛疾病中起到了可 2 观的效果，若联合经典预防性药物效果更明显。 关键词：TI冲M8；胞磷胆碱；谷氨酸；硝酸甘油；偏头痛；大鼠