小鼠Pkd2基因条件性敲除打靶载体的构建.pdfVIP

现代预防医学2∞8 年第 35 卷第5 期 Modem Prevent.i ve Medicine , 2∞8 ， Vol.35 , NO.5 . 92 1 中图分类号: R34 艾民标i只码: A [实验技术及其应用} 文章编号: 1 ∞3-8507(2008105-0921-03 小鼠Pkd2 基因条件性敲除打靶载体的构建 郭红 l ，边国 慧 2 ，用钦2 摘要: (目 的 ]构建小鼠 Pkd2 条件性基因敲除打抱载体，为建立 Pkd2 基因条件性敲除小鼠模型奠定基础。 (方 法]以正常小鼠 ( 129xl/SvJ) 基因组 DNA 为模板，扩增小 鼠 Pkd2 基因一段包括第9 号外显子的长为 9.3 kb 的序列， 通过引入 LoxP 和 Neo 基因等步骤，建立条件性敲除 Pkd2 第 9 号外显子的条件性基因打靶载体。[结果]经多个限制 性核酸酶酶切鉴定和测序证实，所构建的 Pkd2 基因条件性敲除打靶载体符合设计要求。[结论 ]成功构建小鼠条件性 Pkd2 基因敲除打靶集体，为建立 Pkd2 基因条件性敲除小鼠模型奠定基础。 关.词: 条件性基因敲除; Pkd2 基因; 成人多囊肾病 CONSTRUCTION OF TARGETING VECTOR FOR CONDITIONAL KNOCKOUT OF MURINE PKD2 GUO Hong , BJAN Gω-hui ， ZHOU Qin. (Key Lahoratory 01 Biotherapy , West China Hospital , Sch~ol 01 L价 Science ， S比huan Un印ersity， Chengdu 610041 , Chinα) Abs衍act: ( Objective ] To constJUct the targeting vector for conditional kn∞kout of polycystic k:idney diseωe 2 gene (Pkd2 ) . (MethodsJ A 9 .3 kb Pkd2 genomic DNA fra伊lent containing exon 9 , obtained from murine g四omic DNA (129x l/ SvJ ) by PCR. was inserted into T vector (pC R2.1-TOPO) which wωused ω 山e homologous arm. LoxP and Neo were inserted for conditional kn∞kout of 皿on 9 of Pkd2. (ResultsJ 币le correct stn.lCture of the targe山g vector W88 confirmed by restIÍction e昭yme dige町on and s吨uencing analysis. [ Conclusion ] A ta咯;eting vector for conditional knockout of murine Pkd2 has been succe部fully constructed . The construction of targeting vector paves the way for conditional kn∞kout mouse strain generated by ta.rgeted mutation of Pkd2 . Key words : Conditional kn∞kωt; Pkd2 ; Adult polycy剑ic kidney disease 常染色体显性多囊肾病( aULosomal dominant polycystin 小鼠(1 29xl /SvJ)