酵母电感受态细胞制备液.PDF

克 CAT#:81201-20 常温运输和保存 必 隆 系 列 酵母电感受态细胞制备液 Yeast Electro Competent Cell Preparation Solution 使用手册V1. 1 北京天恩泽基因科技有限公司 北京市海淀区上地信息路26 号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦506 网址： ；电话：400-6765278；电邮：order@ 产品及特点 本酵母电感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理酿酒酵母和裂殖酵母电感 受态细胞，使之不但马上能用于电转化，还能长期放置后用于电转化。它具有下 列特点： 1. 操作简单，单溶液制备，除酵母培养的时间外，整个操作只需要 10余分钟。 2. 制备得到的感受态细胞可以-80℃保存一年，方便多次使用，免去每次转化 都要新鲜制备感受态细胞。 3. 主要用于酿酒酵母S. cerevisia 和S. pombe ，但能否用于其他酵母（如C. albicans、Pichia pastoris 等）不详。 6 4. 最高转化效率可达到0.2- 1×10 个转化子/ug 质粒DNA。 5. 得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA 进行转化，例 如YIp, YRp, YCp, YEp 和YAC 等。 6. 可以用于酵母双杂交、定点突变（Site－Directed Mutagenesis）、基因破 坏（Gene Disruption）、等位突变基因修复（Mutant Allele Recovery） 等实验。 7. 本试剂盒足够处理200 mL 酵母菌液，制备40 管酵母感受态细胞。 规格及成分 成 份 编 号 20 次塑料袋包装 本产品 81201 100 mL 使用手册 81201sc 1份 自备试剂 灭菌水，SD 液体培养基（不含氨基酸的0.67% Bacto Yeast Nitrogen Base ， 2%葡萄糖），SD 固体培养基（在SD 液体培养基中再加2%琼脂），YPD 液体培 养基 （1% Bacto Yeast Extract, 2% Bacto Peptone, 2%葡萄糖），YPD 固体 培养基（在YPD 液体培养基中再加2%琼脂） 运输及保存 常温运输和保存，有效期一年。 使用方法 一：电感受态细胞的制备 说明：按本方法制备 1 管酵母电感受态细胞就需要OD600 达到 1.0 的新鲜酵母 培养液 5 mL ，用户需根据制备的酵母感受态细胞数量决定培养细胞的体积。下 面操作只是以 10 mL 酵母为例说明。 1. 培养S.pombe 细胞：挑取新鲜单菌落 （4℃放置不超过3 周的也可以），接 种到 10 mL SD 液体培养基中。30℃摇晃培养，摇床速度250rpm/分钟， 7 直到OD600 达到 1.0左右 （相当于 1×10 细胞/mL）。