重稀碱金属对人红细胞溶血效应的研究.pdfVIP

No．3 陕西科技大学学报 JurL 2008 Vo1．26 JOURNAL OF SHAANXI UNIVERSITY OF SCIENCETECHNOLOGY · 57· 文章编号：1000--5811(2008)03--0057--03 重稀碱金属对人红细胞溶血效应的研究 卢 靖 ，纪 睿。，李翠艳 (1．陕西科技大学材料科学与工程学院，陕西西安 710021；2．陕西能源职业技术学院电子工程系，陕西咸 阳 712081) 摘 要：采用分光光度法对不同实验体系中Rb+／Cs+所引起的人红细胞溶血现象进行了检 测，评估了其毒理效应．实验结果显示：介质中是否存在Rb+，Cs+对细胞相对溶血率没有明显 的影响，不同Rb+／Cs+浓度、不同温育温度和温育时间所引起的红细胞相对溶血率均非常微 弱，铷、铯对人红细胞的毒性微弱． 关键词：铷；铯；人红细胞；溶血效应 中图分类号：O614．1 文献标识码：A 0 引言 重稀碱金属铷、铯容易被生物体吸收进入血液，以离子态存在而不与血浆蛋白相结合，能较快的向全 身转运．铷、铯对生物体的作用复杂：一方面它们可作为药物成分用于治疗癌症、癫痫、抑郁症、老年痴呆等 疾病_1 ；另一方面，铷、铯在有机体内的存在会引发机体不良反应，如干扰心脏周期性变动_5]、引发神经性 病变、促使组织细胞中DNA的变化、引起染色体畸变或断裂等_6]．因此，铷、铯及其化合物对人体的毒性 作用强度值得深人研究． 人红细胞的溶血现象是检测金属离子毒性的方法之一．本研究用分光光度法研究了Rb+，Cs+对人红 细胞的溶血现象，通过测定Rb+／Cs+在不同浓度下诱导的人红细胞相对溶血率(H )来确定其生物毒理 效应． 1 材料与方法 1．1 材料与仪器 人血红细胞由西安市中心血站提供；碳酸铷、碳酸铯(纯度99．5 ，江西锂厂)；氯化钠(分析纯，开封 东大化工有限公司试剂厂)；氯化钾(分析纯，天津市塘沽区德华化学试剂厂)；葡萄糖(分析纯，天津市化学 试剂六厂)；Tris(分析纯，成都化学试剂厂)；盐酸(优级纯，西安市化学试剂厂)；本实验所用血浆等渗缓冲 液PIB的组成为NaC1 154 mmol／L，KC1 5 mmol／L，glucose 10 mmol／L，Tris 10 mmol／L，pH一7．4； NaC1一Tris缓冲液组成为145 mmol／L NaC1，10 mmol／L Tris，pH 7．4．实验所有用水均为石英亚氟高纯 水． 微量连续可调移液器(北京青云卓立精密设备有限公司)；721一分光光度计(上海第三分析仪器厂)；O- rion868型pH／ISE测试仪；Sigma3K一18型台式冷冻离心机；FAI104电子天平(德国赛多利斯股份公 司)；BD-161冰柜(青岛澳柯玛公司)． 1．2 实验方法 1．2．1 人全血的处理和红细胞悬浮液的制备 取一定量的人全血于无菌试管中，4℃下离心分离，弃去上层浅黄色的血浆及中层绒毛状沉淀层．将 底部的红细胞置于3倍量预冷的PIB等渗缓冲液中洗涤3次，尽量得到纯净的红细胞_7]。 取1．5 mL洗涤过的人红细胞与50 mL PIB缓冲液混匀配制成血球比为3 的红细胞悬浮液，用于 * 收稿日期：2OO8一O3—1O 作者简介：卢 靖(1981一)，女，河南省清丰县人，助教，硕士，研究方向：金属复合材料 基金项目：陕西科技大学校级自选项目(ZX06-15) ·58· 陕西科技大学学报 第26卷 Rb+／Cs+溶血效应的实验． 、 l_2．2 分光光度法测定相对溶血率_8．。] 取红细胞悬浮液与不同浓度的RbC1一PIB／CsC1一PIB溶液混合，于37℃温育90 rain后，置冰水浴中1 rain终止反应，在2 500 r／rain下离心5 rain，吸取上清液于5 mm的玻璃比色皿中，用721一分光光度计在 540 nm处测上清液吸光度As 。 ．按同样步骤测定红细胞与不含Rb+／Cs+的PIB溶液及亚氟水温育后离 心上清液的光