黄芪多糖的提取和含量测定研究.pdfVIP

广东饲料 第 17卷第 11期 2008年 11月 蔫 糠 取 禽 意 刘瑞生，薛掌林，张述斌，王必慧 (甘肃省畜牧兽医研究所，平凉744000) [中图分类号】S816．17 [文献标识码】C 文【章~ ]1005—8613(2008)1】一0037—02 黄芪为豆科植物，是蒙古黄芪或膜荚黄芪的干 滤。将滤渣放入干燥器中，一2C冷冻真空干燥，即 燥根，主要药理成分是黄芪多糖 (APS)和黄芪甙。 得到APS。 APS在医学和兽医临床上研究应用较为广泛，可作 1．2．2黄芪多糖的含量测定：①葡萄糖标准溶 为免疫促进剂或调节剂，同时具有抗病毒、抗肿瘤、 液 的制备 。取经 105℃干燥至恒重 的葡萄糖 抗衰老、抗应激、抗氧化等作用(张立洲 ，1996；郭小 100mg，置 100mL容量瓶中加水溶解，并稀释至刻 清等，2004)。目前 APS的提取主要采用水提取和 度，摇匀。精密量取 10mL，置 10mL容量瓶中，加水 CaO提取两种工艺 ，水提取分离工艺不成熟，效率 至刻度 ，摇匀 ，配成0．1mg／mL的葡萄糖标准溶液。 较差，提取成本较高，严重影响了APS的研究开发 ②标准曲线的绘制。准确吸取葡萄糖标准溶液 利用。李红民等(2000)报道 ，用 pH9～10的CaO水 0．1-0．6mL共6份，分别置 25mL容量瓶中，加蒸馏 溶液提取APS，得率显著提高，成本下降。我们用水 水补充至 2mL，再加入 5％苯酚溶液 1．0mL，摇匀 ， 提取法和CaO溶液提取法进行 APS的提取并测定 迅速滴加浓硫酸 5．0mL，摇匀，放置 5．0mL，置 80℃ 含量，以便从中筛选出较好的提取方法，为生产实 水浴中加热 15rain，取出，迅速冷却至室温。另以 践提供参考。 2．0mL蒸馏水 同上平行操作作为空 白对照 ，在 1 材料与方法 490nm波长处测定吸光度，并求出回归方程：C= 1．1材料与试剂 0．21216A一6．37×10，r=0．997057。其中C：葡萄糖 黄芪根：购 自平凉市某中药材门市部。 浓度，A ：吸光度。③黄芪多糖含量测定。取提取并 葡萄糖 、苯酚 、浓硫酸、95％乙醇、丙酮，均为分 经 105 干燥至恒重的APS50mg，置于 50mL容量 析纯。21分光光度计，TN型托盘式扭力天平，容量 瓶中，加蒸馏水溶解至刻度，摇匀，准确吸取 10mL， 瓶，水浴锅，干燥器，粉碎机等。 置 100mL容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀， 1．2方 法 配成0．1mg／mL的APS溶液。 1．2．1黄芪多糖的提取。水提取法用蒸馏水煮 吸取上述溶液0．5mL，置 25．0mL容量瓶中，加 沸提取，CaO溶液提取法用pH9～10的CaO溶液煮 蒸馏水补充至2mL，依法测定吸光度值，并代人回 沸提取，浓缩时调至pH6．5，以后两法步骤相同。 归方程计算，求得APS的相对含量。 ①称取黄芪根 lkg，去掉杂质和泥土，粉碎成 2 结果与分析 粉末。②黄芪根粉末中加以6～7倍的蒸馏水 (或 2．1黄芪多糖的物理性状 CaO溶液)，煮沸 1．5h，用4层纱布过滤，滤渣用同 提取的APS为灰 白色粉末 ，易溶解于水，溶液 样方法煮沸 3次。③合并滤液 ，调pH至6．5左右 ， 呈乳 白色，无杂质。 加热浓缩至一定量。④将浓缩液以2000r／min离心 2．2黄芪多糖的收率