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十五氨基酸多肽蛋白质.pptVIP

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十五氨基酸多肽蛋白质

一、氨基酸 (Amino Acid)(重点内容) (一)结构特点 (二)20 种基本氨基酸 (三)氨基酸的特性 (四)氨基酸的合成与拆分 二、肽 (Peptides) 三、蛋白质 (Proteins) 第十五章 氨基酸、肽和蛋白质 Amino Acids, Peptides and Protein I 氨基酸 20 standard amino acids 10 essential amino acids: Val, Leu, Ile, Thr, Met, Lys, Arg, Phe, His, Try 一、氨基酸的构型 D L 常见的组成蛋白质的各种氨基酸,除甘氨酸外,都有 手性碳,而且连接羧基与氨基的α–碳原子的构型都是相 同的L–型。 用D,L标记法表示氨基酸的构型,是以距羧基最近的 手性碳原子为标准. 二、化学性质 1、两性 高熔点(实际为分解点)、难溶于非极性有机 溶剂等性质说明氨基酸在结晶状态是以两性离子存 在的。 但–COOH结合质子的能力与 给出质子的能力与 不是完全相同的,也就是上述正离子与负离子的量是不等 的,所以中性氨基酸水溶液的PH不等于7,一般略小于7, 就是负离子要多些;加入适量的酸可使正负离子的量相等 酸性氨基酸水溶液的PH值必然小于7,所以必须加入 较多的酸才能使正负离子量相等。反之,碱性氨基酸水溶 液中正离子较多,则必须加入碱,才能使负离子量增加。 所以碱性氨基酸的等电点必然大于7. 各种氨基酸在其等电点时,溶解度最小,因而用调节 等电点的方法,可以分离氨基酸的混合物。 酸碱性(Acid-Base Properties) Isoelectric Point (氨基酸的等电点) 如果在某一pH 值下,氨基酸所带正电荷的数目与负电荷的数目正好相等,即净电荷为零,则称该 pH 值为该氨基酸的等电点 (pI)。 ① pI 与解离常数 pK间的关系 Neutral amino acids: pI = (pK1 + pK2)/2 Acidic amino acids : pI = (pK1 + pKRCOOH)/2 Basic amino acids : pI = (pK1 + pKRNH2)/2 等电点时,amino acids 几乎全部以两性离子 I 的形式存在, 并伴以极少量、严格相等的 II 和 III。 ③ 处于等电点的氨基酸,其溶解度最小。 Titration Curve and pI Calculation of pI (1) Calculation of pI (2) Calculation of pI (3) ④纸电泳 (Paper electrophoresis) pH pI, 样品带正电荷,样品点向阴极移动 pH pI, 样品带负电荷,样品点向阳极移动 pH = pI, 样品不带电荷,样品点不移动 2、与亚硝酸的作用 反应是定量完成,可测分子中氨基的含量。 这个反应 叫做范斯莱克(van Llyke)氨基测定法。 3、与甲醛作用 4、络合性质 与 可形成蓝色络合物结晶,可用以分离或鉴定氨 基酸。 5、氨基酸的受热反应 6、茚三酮反应 α—氨基酸与茚三酮水溶液一起加热生成兰紫色的 有机物质 7、失羧作用 α–氨基酸小心加热或在高沸点溶剂中回流,可失去 二氧化碳得按 8、失羧和失氨作用 Synthesis of Amino acid 还原氨化法 a-卤代酸的氨化 Gabriel-丙二酸酯合成法 Strecker合成法 消旋产物 Gabriel-丙二酸酯合成法 用这种方法可以得到其他合成方法难以得到的α-氨基酸, 如甲硫氨酸(蛋氨酸) Strecker合成法 —— 最早发现的合成方法 II 多肽 N—端 C—端 由三种不同氨基酸形成的三肽可能有6种,四肽可有 24种,六肽可有720种。 一、多肽结构的测定 端基标记法 1、 2,4—二硝基氟苯法(DNFB—Dinitrofluorobenzene) DNFB为标记N-端的试剂。多肽与2,4—二硝基氟苯作 用后,再将肽链水解,则N-端的氨基酸便生成黄色的 N-(2,4-二硝基苯基)氨基酸,通过纸层析便可确定 N-端是哪一种氨基酸。 2、 异硫氰酸酯法 二、多肽的合成 端基保护法 氯甲酸苄酯法 H2/P 固相合成法 (苯乙烯与二乙烯苯的共聚物) 保护基P III 蛋白质 多肽分子质量在10,0

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