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非那西丁在大鼠体内的药代动力学研究报告组员:支卓尔潘诗苑张德铭张鑫男学号:1241613 1241614 1241615 1241616实验材料:1.仪器高效液相色谱仪,台式离心机,离心管,注射器2.试剂非那西丁,10%高氯酸,色谱纯甲醇、乙腈3.实验动物大鼠,180-220g,禁食不禁水24h给药方案和血浆采集:取大鼠,尾静脉注射非那西丁(10mg/kg),5,10,15,30,45,60,90min于眼底静脉丛取血0.4ml,肝素抗凝,4000r/min离心10min,取100μl 血浆,于冰箱中保存。血浆样品处理:100μl 血浆中加入50μl 10%高氯酸,12000r/min离心10min,取上清供HPLC分析。色谱条件:检测波长:254nm,流速:1.0ml/min,柱温:40℃,流动相:40(乙腈):60(50mM磷酸盐缓冲液)。缓冲液配制(6.8克磷酸二氢钾,150ml氢氧化钠溶液0.1M,配制成1L的缓冲液),进样量:20μl标准曲线制备:精密称取非那西丁对照品10.0mg,置于10ml量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,得1mg/ml溶液(非那西丁在0. 019 531 ~ 40μg/ml浓度范围内线性关系良好),后依次加水稀释得100,50,25,12.5,6.25,3.125,1.562μg/ml标准曲线系列工作液。取标准曲线系列工作液各10μl,分别加入空白血浆90μl,后按“血浆样品处理”方法进行处理,以峰面积比对应其浓度进行线性回归。标准曲线浓度(ug/ml)t (min)峰面积0.00 00.16 331 363 325 3.872116142.50 2.871139785.00 3.8094200010.00 3品数据采血时间minc ug/ml峰面积lgc4.500.3907258281000.6187043772000.196406335301.018104170.007747778451.3663139000.1355460686000.1349552789000.220908796讨论非那西汀应为线性消除,故其半衰期为0.693/k, 经过5个半衰期药物基本消除完全。本次实验实际结果无法按单房室二房室模型拟合,但标准曲线结果较好,因此可排除仪器问题,那么应该是样品的问题,进样步骤因个人操作顺序不同存在操作误差。第二次实验在离心后得上清液,未与沉淀蛋白分离直接移取上清液时使其中混有沉淀而产生一定误差。动物实验中尾静脉注射操作存在过失,未能按准确时间将药物注射入静脉内,可能导致药物吸收出现问题,致使结果异常。
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