胆盐水解酶基因在植物乳杆菌KLDS1.0386中的表达研究.pdfVIP

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2016, Vol.32, No.7 胆盐水解酶基因在植物乳杆菌KLDS1.0386中 的表达研究 唐雅茹，李柏良，李婉，于上富，霍贵成 （东北农业大学乳品科学教育部重点实验室，黑龙江哈尔滨 150030） 摘要：本文从转录水平上研究了四种胆盐水解酶基因在植物乳杆菌 KLDS1.0386 中不同生长阶段的表达情况，并且分别以不同 浓度的牛磺脱氧胆酸盐和甘氨脱氧胆酸盐为底物，以 16s rRNA 作为内参基因，利用实时荧光定量 PCR 技术研究不同浓度底物下的胆 盐水解酶基因（bsh1 、bsh2 、bsh3 、bsh4 ）表达的变化规律。结果显示，内参基因和目的基因的扩增效率均在90%~105%之间，说明 目的基因的表达量可以被很好的反应出来。通过实时荧光定量PCR 结果分析可知，植物乳杆菌 KLDS1.0386 中的4 种胆盐水解酶基 因随着生长时间的延长，表达量显著增加，而且在两种胆盐中都表达，基因表达量都被不同剂量（1%、2% 、3% ）的胆盐上调，上 升幅度随着胆盐浓度的增加表现出极显著的增加趋势，而且胆盐不同，同浓度时每个基因的表达量也各不相同，在甘氨脱氧胆盐中的 表达量普遍高于牛磺脱氧胆盐。 关键词：胆盐水解酶；基因表达；甘氨脱氧胆酸盐；牛磺脱氧胆酸盐 文章篇号：1673-9078(2016)07-79-84 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.7.013 Expression of Bile Salt Hydrolase Genes in Lactobacillus plantarum KLDS1.0386 TANG Ya-ru, LI Bai-liang, LI wan, YU Shang-fu, HUO Gui-cheng (Key Laboratory of Dairy Science, Ministry of Education, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China) Abstract: The expression levels of four key genes encoding bile salt hydrolase in Lactobacillus plantarum KLDS1.0386 were investigated at the transcriptional level during the different growth phases. Different concentrations of taurodeoxycholate and glycodeoxycholate were used as substrates, 16s rRNA gene was used as the internal standard, and real-time quantitative polymerase chain reaction (PCR) method was used to detect the variations in the expression of the bile salt hydrolase genes (bsh1, bsh2, bsh3, and bsh4) in the presence of taurodeoxycholate and glycodeoxycholate at different concentrations. The results showed that the amplification efficiencies of the reference gene and target genes were in a r