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猪胚胎培养常用配方
常用培养基配方（1）猪卵母细胞体外成熟培养液1TCM-1990.95g2聚乙烯醇0.1%0.1g3D-葡萄糖3.05 mM0.0549g4丙酮酸钠0.91mM0.01g5NaHCO30.22g6青霉素75μg/ml0.0075g7链霉素50μg/ml0.005g8胱氨酸0.57mM0.006g9LH(100×)*50μg/mL10FSH(100×)*50μg/mL11EGF(1000×)*10μg/mL12ddH2O100ml* 临用四小时前加（2）猪体外操作液1TCM-1990.95g90)2NaHCO30.22g3Hepes0.5958g4BSA0.3g5ddH20100ml(3)猪胚胎培养液（PZM-3）1NaCl108.00mM0.3156g2KCl10.00mM0.0373g3KH2PO40.35mM0.0024g4MgSO4·7H2O0.40mM0.0024g5NaHCO325.07mM0.1055g6Na-pyruvate0.20mM0.0011g7Ca-（lactate）2·5H2O2.00mM0.0308g8L-glutamine1.00mM0.0073g9hypotaurine5.00mM0.0273g10BME amino acid*20ml/L1ml11MEM non-essential amino acid*10ml/L0.5ml12超纯水50ml* 定容后加（4）猪受精液（mTBM）1NaCl113.1mM0.3305g2KCl3.0mM0.0112g3CaCl2·2H207.5mM0.0051g4Tris20.0mM0.1211g5Glucose11.0mM0.0991g6Na-pyruvate5.0mM0.0275g7caffeine2.0mM0.0194g8BSA0.2%0.1g9Cysteine0.57mM0.006g10超纯水50ml(5)猪洗清液（DPBS）（pH=7.8）1KCl 2.7mM0.0201g2KH2PO41.1mM0.0150g3MgCl20.5mM0.0048g4NaCl 138.0mM0.8065g5Na2HPO3·12H2O8.1mM0.2901g6D-Glucose5.6mM0.1009g7Phenol Red0.01mM0.0004g8Na-pyruvate 0.33mM0.0036g9青霉素75μg/ml0.0075g10链霉素50μg/ml0.005g11BSA0.1%0.1g12超纯水100ml电融合液（100ml）1Mannitol(甘露醇)0.3mol/L5.4651g2氯化钙0.0147g3氯化镁0.0020g4HEPES0.0120g注氯化钙，氯化镁用皿称0.147g和0.20g。溶于1ml水作10*浓储，100ml体系加100μL。细胞分离液配制45%细胞分离液：用等量的90％细胞分离液与洗精液混匀，过滤除菌，4℃备用90%细胞分离液：45ml Percoll加5ml lO×洗精液，混匀后，弃去3.75ml，再加3.75ml水，过滤除菌，4℃备用。
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