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HPLC法测定消渴丸中葛根素含量[摘要] 目的 建立消渴丸中葛根素的含量测定方法。方法 采用HPLC法，色谱柱为Hypersil BDS C18色谱柱，流动相为甲醇－水（25∶75），流速为1.0 ml/min，检测波长为250 nm。结果 进样量在0.094 1～0.470 5 ug范围内线性关系良好（r=0.9997. n=5）,平均回收率为101.0%，RSD为0.59%（n=5）。结论 该方法操作简单，精密度高，重现性好，可作为控制消渴丸质量的方法。 [关键词] 葛根素；含量测定；HPLC；消渴丸 Determination of pueranin in Xiaokewan by HPLC WEI Yu-de, TANG Hai-yan.Institute for Drug Control of YongZhou city, Hunan Province,Yongzhou425006, China 【Abstract】Objective To determinate Pueranin in Xiaokewan by HPLC. Methods Hypersil BDS C18Column was used with methanol-water（25∶75）as mobile phase，The flow rate was 1.0 ml/min,Detection wavelength was set at 250nm. RESULTSGood Linearity of Pueranin was obtatined （ r = 0.999 7. n = 5 ） with in the rang of0.094 1-0.470 5 μg. The average recovery was 101.0%, repeatability was good, and RSD was 0.59% （ n = 5）. Conclusion The methodis simple, accurate and repeatabily, and can be used for the drug control. 【Key words】 Pueranin ; Determinate ; HPLC; Xiaokewan 消渴丸是由葛根、地黄、黄芪、天花粉、玉米须、五味子、山药、格列本脲等七味中药和一味西药加工而成的中西药结合制剂，具有滋肾养阴，益气生津之功效。临床上主要用于治疗2型糖尿病。原标准中只有葛根素的薄层鉴别，没有含量测定。葛根是方中君药，葛根素为葛根的主要成分。为了有效控制制剂的质量，本实验参考文献[1-2]，采用高效液相色谱法测定消渴丸中葛根素的含量，方法简便，精密度高，结果准确可靠。 1．仪器与试药 高效液相色谱议：Waters高效液相色谱系统，1525泵，2996紫外检测器（美国），Empower工作站；葛根素对照品（批号：110752-200410，供含量测定用，中国药品生物制品检定所）；甲醇（色谱纯），水为重蒸水，消渴丸（自购）。 2．方法与结果 2.1对照品溶液的制备：精密称取葛根素对照品适量，加25%甲醇制成50g/ml溶液，即得。 2.2供试品溶液的制备：取本品10丸，研细，精密称取约0.2 g，置100 ml具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇50 ml，称定重量，加热回流30 min，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，滤过，滤液用微孔滤膜（0.45m）滤过，取滤液，即得。 2.3色谱条件：依利特Hypersil BDS C18色谱柱（4.5 mm×200 mm，5m）；流动相：甲醇－水（25∶75）；检测波长：250 mm，柱温：室温；体积流量：1.0 ml/min；理论板数按葛根素峰计算，不低于2000。 2.4空白试验：取除葛根以外的各原药材，按处方量制备供试品，照2.2项下方法制备空白对照溶液，微孔滤膜（0.45 m）滤过，进样，结果表明，本实验条件下，其他成分对葛根素的测定无干扰。见图1。 2.5线性关系的考察：精密称取葛根素对照品9.41 mg，置100 ml量瓶中，加25%甲醇溶液使溶解，并加至刻度，摇匀，即得（94.1 g/ml）。用25%甲醇依次稀释得到9.41、18.85、28.23、37.64、47.05g/ml的溶液，按上述色谱条件各取10 l进样，测定峰面积。以峰面积y为纵坐标，进样量x为横坐标，得回归方程：y=3283x+31 522， =0.999 7。结果葛根素在0.094 1~0.470 5 g与峰面积呈良好的线性关系。 2.6精密度试验：精密吸取葛根素对照品溶液10l，在上述色谱条件