HPLC法测定灵芝北芪片中腺苷含量.docVIP

HPLC法测定灵芝北芪片中腺苷含量【摘 要】：目的：建立高效液相色谱法测定灵芝北芪片中腺苷的含量，以便更有效的控制其内在质量。方法：采用高效液相色谱法VP－ODS柱（150mm×4．6mm，5μm）；磷酸盐缓冲液（PH6．5）－甲醇（173），检测波长260nm，流速1．0mlmin－1，柱温为室温。结果：腺苷在3．93～39．28mgL－1（r＝0．9999）范围内线性关系良好，平均回收率为99．5％，RSD＝0．89％。结论：本法简便，灵敏，重复性好，可用于灵芝北芪片中腺苷的含量测定。 【关键词】：灵芝北芪片高效液相色谱法腺苷含量测定 【中图分类号】R284．1；R944．4【文献标识码】A【文章编号】1007－8517（2008）08－0042－02 Determination of adenosine in Lingzhi Beiqi Pian by HPLC Zhao Cheng LuAn Institute for Drug Control ，LuAn 237000，China AbstractAim To establish a method for the determination of adenosine in Lingzhi Beiqi Pian ．MethodsHPLC method was used ．The samples were separated by VP－ODS column（150mm×4．6mm，5μm） The mobile phase was phosphate acid buffer solutionPH6．5－ methanol173，The detection wavelength was 260nm ，Flow rate was 1．0 ml．min－1 ，The column temperature was Indoor temperature．ResultsThe linear range ofadenosine was3．93mg．L－1～39．28mg．L－1 r＝0．9999，n＝6．The average recovery was 99．5％， RSD＝0．89％． Conclusion This method is simple， sensitive ，accurate and can be used to determine the contents of adenosine in Lingzhi Beiqi Pian． Key words Lingzhi Beiqi PianHPLC adenosine determination 灵芝北芪片是由灵芝膏粉、黄芪膏粉两味中药提取物组成，具有养心安神、补气益血的功效。用于神经衰弱，失眠健忘，食少体倦，气短多汗等症的治疗1。现行标准中尚无相关有效成分的定量指标。灵芝作为方中君药，决定了本方制剂的功效，腺苷是灵芝中的主要活性成分2，本文建立高效液相色谱法测定其中腺苷的含量，为有效控制其内在质量，进一步完善该制剂的质量标准提供了实验依据。 1 仪器和试药 1．1 仪器 日本岛津高效液相色谱仪LC－10ATVP、SPD－10AVP、CBM－102色谱工作站，VP－ODS色谱柱150mm×4．6mm，5μm，梅特勒－托利多AB135－S电子天平。 1．2 试药 腺苷对照品879－200202，供含量测定用，中国药品生物制品检定所；灵芝北芪片批号060227，060415，061012，070124，070517，市售产品；甲醇为色谱纯天津市四友生物医学技术有限公司；水为重蒸馏水；其它试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2．1 色谱条件 色谱柱为VP－ODS色谱柱150mm×4．6mm，5μm；流动相：磷酸盐缓冲液pH6．5取0．01mol／L磷酸二氢钠68．5ml与0．01mol／L磷酸氢二钠31．5ml，混合pH6．5―甲醇173；流速为1．0mlmin－1；检测波长为260nm；柱温为室温。理论板数按腺苷峰计算不低于2000。 2．2 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥12小时的腺苷对照品9．82mg，置50ml容量瓶中，用15％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得浓度为196．4mgL－1。 2．3 供试品溶液的制备 取供试品，研细，精密称取1．0g，置25ml容量瓶中，加15％甲醇适量，超声处理30min取出放冷，加15％甲醇至刻度，用0．45μm滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。 2．4 阴性溶液的制备 按处方比例称取除灵芝膏粉外的其它药材，按灵芝北芪片的制备工艺及供试品的制备方法制备阴性溶液。 2．5 空白试