高效液相色谱法测定调肝灵片中大黄素及大黄酚含量.docVIP

高效液相色谱法测定调肝灵片中大黄素及大黄酚含量【摘要】 目的 建立以高效液相色谱法测定调肝灵片中大黄素、大黄酚含量的方法。方法 色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相：甲醇-0．1%磷酸溶液(85:15)为流动相；流速：1．0 ml/min；检测波长：254 nm；柱温：30℃，进样量10 μl。结果 大黄素和大黄酚分别在0．005 6~0．028 μg之间和0．011 2~0．056 μg(r=0．999 8)之间成线性关系。大黄素、大黄酚总量平均回收率为100．13%(RSD＝2．53%，6例)。结论 本方法简便、准确 、重现性好。? 【关键词】调肝灵片；高效液相色谱法；大黄素、大黄酚；含量测定；色谱法 Determination of emodin and chrysophanol in tiaoganling pills by HPLC LIU Yu-bin.Heilongjiang University of Chinese Medicine，Heilongjiang 150040,China ? 【Abstract】 Objective To establish a quality standard of Tiaoganling pills.Methods Hypersil C18 was used with methanol-0．1%phosphoric acid as mobile phase(85:15).The flow rate was 1．0 ml/min,detective wavelength was 254 nm,column temperature was 30℃ and injection valume was 10 μl.Results Emodin and chrysophanol showed a good linear relationship in the range of 0．005 6~0．028 μg and 0．011 2~0．056 μg(r=0．999 8).The average recovery was 100．13%(RSD=2．53%,6).Conclusion The methods is simple,accurate and reproducible.? 【Key words】Tiaoganling pills; HPLC; Emodin; Chrysophanol; Contant determination 调肝灵片是在原调肝灵丸的基础上进行的中药改剂剂型，有清热解毒，疏肝行滞的功能。用于肝郁气滞。建立以高效液相色谱法测定调肝灵片中大黄素、大黄酚含量的方法，对提高中药制剂质量监控，完善质量标准体系具有实际应用意义。? 1 仪器与试药? 1．1 仪器 美国Watets 6000E 高效液相色谱仪，Millennidm 32数据处理系统。? 1．2 试药 对照品:大黄素、大黄酚批号：0756-200711中国药品生物制品检定所，调肝灵片(黑龙江中医药大学中医药研究院自行研制，批号080925)。甲醇(液相用)为色谱纯，所用其他试剂均为分析纯。? 2 方法与结果? 2．1 色谱条件[1]色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，Kromasil色谱柱(4．6 mm×200 mm，5 μm)。流动相：甲醇-0．1%磷酸溶液(85?∶?15)为流动相；流速：1．0 ml/min；柱温：30℃。检测波长：254 nm；进样量10 μl。? 2．2 对照品溶液的制备 分别精密称取大黄素和大黄酚对照品适量，加甲醇制成每1 ml含大黄素2 μg、大黄酚3 μg的混合溶液，即得。 ? 2．3 线性关系考察 分别精密吸取“2．2”项下对照品溶液，2、4、6、8、10 μl,分别按“2．1”项下色谱条件进样，测定峰面积，以浓度为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，进行线性回归，得到线性方程(n=6)。大黄素Y=4 566 258．7X+450．γ＝0．999 8；大黄酚Y=8 544 660．7X-3 367．2，γ＝0．999 8。试验证明大黄素和大黄酚分别在0．005 6~0．028 μg之间和0．011 2~0．056 μg之间成线性关系。并通过原点。? 2．4 稳定性试验 取同一批号调肝灵片(批号：080925)10片，除去薄膜衣，研细，取粉末0．25 g，精密称定，按“2．8”项下方法操作，再精密吸取供试品溶液10 μl，根据设定间隔时间0、1、2、3、4、5 h，按“2．1”项下色谱条件进样，测定峰面积。结果，大黄素平均峰面积值为96 024(RSD=1．0%，6例)；大黄酚平