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高效液相色谱法测定骨复康胶囊中龙血素A含量
高效液相色谱法测定骨复康胶囊中龙血素A含量【摘要】 目的 建立骨复康胶囊中龙血素A的含量测定方法。方法 采用HPLC法测定骨复康胶囊中龙血素A的含量。Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱;甲醇-1%冰醋酸溶液(55:45)为流动相;检测波长为280 nm;流速为1.0 l/min;柱温:35℃。结果 龙血素A在0.476~4.284 μg 范围内呈现良好的线性关系;回收率为99.51%,RSD为0.78%(N=6)。结论 该方法简便、准确,重现性好,可用于骨复康胶囊的质量控制。
【关键词】
骨复康胶囊;龙血素A;高效液相色谱法
Determination of Loureirin Ain Gufukang Capsule by HPLC LI Ci-en,LI Gong-ying,SU Yu-zhi.The first affiliated Hospital of Guangzhou University of T.C.M.,Guangzhou 510405,China
【Abstract】 Objective To develop determination method for the assay of Loureirin A in Gufukang Capsule.Methods Separation was performed on a Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)column.The mobile phase consist of methanol-1%acetic acid(55:45).The flow rate was 1.0 ml/min.The UV detection was set at 280 nm,and the column temperature was 35℃.Results Loureirin A had a good linear in the range of 0.476-4.284 μg.The average recovery of Loureirin A was 99.51%with RSD 0.78%(n=6).Conclusion The methodis simple,sensitive andrapid and it can be applied to make quality control of Gufukang Capsule.
【Key words】
Gufukang capsule;Loureirin A;HPLC
骨复康胶囊由龙血竭、三七、当归、骨碎补等多味中药组成,具有健骨、壮阳、益气生新、强壮筋骨的功效,主要用于骨关节损伤、中后期骨痂生长缓慢、筋肌乏力、胃纳不振等,临床取得较好疗效。为了更好地控制制剂的质量,保证临床用药安全有效,现采用高效液相色谱法对方中龙血竭所含龙血素A进行含量测定,探讨该方的质量控制方法,为保证制剂的质量奠定基础。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Agilent 1100高效液相色谱仪,DAD检测器,四元梯度泵,G2170AA数据处理系统。
1.2 试药 甲醇为色谱纯试剂(一级),水为双蒸水,其它试剂均为分析纯。龙血素A对照品(由中国药品生物制品检定所提供,批号:111660-200402)。
2 实验条件
2.1 色谱条件 色谱柱:Kromasil(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇-1%冰醋酸(55:45);检测波长:280 nm;流速:1.0 ml/min;柱温:35℃。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取龙血素A对照品约5 mg,置50 ml量瓶中,加甲醇使溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。
2.3 供试品溶液的制备 取本品内容物研细,取约1 g,精密称定,加入甲醇20 ml,超声处理40 min,放冷,滤过,滤液置25 ml量瓶中,用少量甲醇分次洗涤容器和残渣,洗液滤入同一量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀。用0.45 μm微孔滤膜过滤,滤液作为供试品溶液。
2.4 线性范围的考察 分别精密吸取不同浓度龙血素A对照品溶液(每1毫升中含龙血素A分别为95.20、285.64、476.00、666.40、856.80 μg)5 μl进行色谱测定,按上述色谱条件测定峰面积,并以峰面积(Y)对龙血素A含量(X)进行回归,得标准曲线,Y=3 725.372 2x+4.466 489 4,r=0.999 99。表明龙血素A在0.476 0~4.284 6 μg范围内呈线性关系。
2.5 精密度试验 精密吸取对照品溶液(476.00 μg/ml)5 μl重复进样6次,以
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