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微生物学通报 DEC 20, 2012, 39(12): 1778−1786
Microbiology China © 2012 by Institute of Microbiology, CAS
tongbao@
简 报
鸡β-防御素7 在大肠杆菌中的表达及活性分析
1 1* 1 2*
李民欢 祁克宗 涂健 钟瑾
(1. 安徽农业大学 动物科技学院 安徽 合肥 230036)
(2. 中国科学院微生物研究所 北京 100101)
摘 要: 【目的】根据鸡β-防御素7 (Gal-7)的成熟肽基因序列合成基因, 构建表达Gal-7
的大肠杆菌工程菌, 研究重组鸡防御素 Gal-7 成熟肽的体外生物活性。【方法】将合成的
gal - 7 基因克隆到大肠杆菌表达载体pGEX-6p-1 中, 得到重组质粒pGEX-6p-gal7 , 转化大
肠杆菌 BL21(DE3), 经 IPTG 诱导表达得到含 GST 标签的融合蛋白 GST-Gal7; 之后用
Prescission 蛋白酶将 GST 标签切除, 并对成熟肽进行质谱分析; 再利用琼脂打孔扩散法
检测Gal-7 成熟肽的体外抑菌活性, 用2 倍稀释法测定对指示菌的最低抑菌浓度。【结果】
成功构建Gal-7 大肠杆菌异源表达工程菌, 表达纯化的重组Gal-7 成熟肽质谱鉴定分子量
为 5 516 Da, 其对黄色微球菌(NCIB 8166)、金黄色葡萄球菌(ATCC 25923) 、粪肠球菌
(ATCC 29212) 、大肠杆菌(CMCC 44102)均有抑菌活性, 最低抑菌浓度分别为 16.875、67.5 、
67.5 、135 mg/L。【结论】获得表达鸡Gal-7 成熟肽的大肠杆菌工程菌, 并且切除GST 标
签的Gal-7 成熟肽具有生物活性。
关键词: β-防御素, Gal-7 成熟肽, 异源表达, 抗菌活性
基金项目：国家 863 计划项目(No. 2006AA10Z320); 高等学校省级优秀青年人才基金立项项目(No. 2009SQRZ036)
*通讯作者：祁克宗 : Tel: 86-551-5786305; : qkz@
钟瑾 : Tel: 86-10 : zhongj@
收稿日期：2012-03-22; 接受日期：2012-05-30
李民欢等 : 鸡 β-防御素 7 在大肠杆菌中的表达及活性分析 1779
Heterologous expression of chicken beta-defensin-7 in
Escherichia coli and antimicrobial activity analysis
LI Min-Huan1 QI Ke-Zong 1* TU Jian 1 ZHONG Jin2*
(1. College of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University , Hefei , Anhui 230036, China)
(2. Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China)
Abstract: [Objecti
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