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以我们的经验，溶解肽是一个很重要的环节。如果溶解不当可能导致肽损失 或者实验失败。肽的溶解性主要取决于肽的序列，所以，如果实验允许，肽序列 中至少应包含20% 的带电残基以增加其溶解度。 在使用之前，客户可以遵循以下三个基本原则来选择合适的溶剂溶解多肽。 首先，所选溶剂一定能充分溶解多肽，其次，所选溶剂能与实验条件兼容，最后， 所选溶剂不能与肽反应，也不能使肽降解。只要肽的量允许，可以先用少部分肽 溶解，然后再将全部样品溶解。如果需要从溶剂中回收肽，可以选择一种初始溶 剂使其在冻干后容易去除。 以下建议或许对您溶解肽有所帮助： 1. 少于 5 个氨基酸的肽一般溶于水溶液，强疏水的氨基酸（W ，I，L，F，M， V ，Y ）除外。 2. 如果带电氨基酸平均分布于全部序列中，那么含有＞25%带电氨基酸（E，D， K，R，H）的亲水肽和含有＜25%疏水氨基酸的肽一般都能溶于水溶液。多肽 的纯化系统一般为0.1%TFA/水和0.1%TFA/CAN。因此，如果肽溶解在没有缓 冲能力或者缓冲能力很弱的缓冲液中，结果可能导致肽溶液呈酸性。在使用 别的方法溶解肽时务必使溶剂的pH值近乎中性。酸性肽（E+D残基数多于 K+R+H残基数）和碱性肽 （K+R+H残基数多于E+D残基数）在中性pH值条件 下比在酸性pH值下更易于溶解。 3. 疏水氨基酸含量为 50%～75%的肽，即使序列中含有25%带电氨基酸也有可 能不溶于水或者部分溶解。最好先把肽溶于最少量的强溶剂（如：DMF，ACN ， 异丙醇，乙醇，乙酸，4-8M GdnHCl 或尿素，DMSO （序列中没有C，W ， M 时），及其它类似的有机溶剂，最好将溶解肽的有机溶剂缓慢地逐滴加入 水溶液中。如果溶液变浑浊，可能是达到了溶解极限，继续溶解就没什么用 了。需要注意的是，最开始选择的溶剂应该与实验系统兼容。 4. 疏水氨基酸含量＞75%的强疏水肽一般也不溶于水溶液。此类肽也应该先用 强溶剂（如：TFA，甲酸）溶解，如果将其加入到水溶液中也可能产生沉淀。 最后的肽溶液可能需要高浓度的有机溶剂使之变性，而有机溶剂一般不用于 活细胞的生物功能研究。 5. S ，T ，E，D，K，R，H，N，Q，Y 含量高（＞75% ）的多肽序列容易形成 多余的分子间氢键网络，在浓的水溶液中容易形成凝胶。此类肽可以用步骤 3 所述方法溶解。 为了减少溶解中可能出现的问题，建议客户从设计上和序列上多考虑，以改 善肽的溶解度。 用哪种溶剂溶解合成肽一直是困扰多肽工作者的一个难题。根据不同的氨基 酸序列，可以参考以下方法来溶解合成肽。最好是先将少量肽用水溶液溶解，不 要一次将全部样品都溶解掉。 1. 将酸性氨基酸 Asp (D) ，Glu (E)和 C 端-COOH.的值定为-1 。 2. 而将碱性氨基酸 Arg (R) ，Lys (K)，His (H)的值定为+1。 3. 计算肽中全部电荷量。 4. 如果肽的全部电荷为正值，则肽呈碱性，可以先用水溶解。如果肽不溶于水， 可以用 10%乙酸或者更高浓度的乙酸溶解。如果肽一点都不溶，加入 TFA(50ul)助溶，并用去离子水稀释至 1ml。 5. 如果肽的全部电荷为负值，则肽呈酸性，可以先用水溶解。如果肽不溶于水，， 加入 NH4OH(50ul) 助溶，并用去离子水稀释至 1ml。 6. 如果肽的全部电荷为 0，则肽呈中性。中性肽需要用乙腈、甲醇、异丙醇等 有机溶剂来溶解，也可以加入变性剂（如：尿素、盐酸胍等）。 实例： KRLMKSIEVIMPL: (+3) + (-2) = +1。此条肽呈碱性。见以上步骤 4 。 LVKMKSIEDPDCE: (+2) + (-5) = -3。此条肽呈酸性。见以上步骤 5 。 北京赛百盛基因技术有限公司 全国统一热线：400 666 3029 地址：北京市海淀区上地四街 1 号院 2 号楼 202 室 邮编：100085 电话：01046，01092 传真：010 Email ：info@ Http ：// ������������������������������