多重PCR法对乳制品中3种致病菌的同时快速检测 - 南京市产品质量 .PDFVIP

中国乳品工业 zgrpgy@163.com 多重 法对乳制品中 种致病菌的同时快速检测 PCR 3 杨军 张驰 刘新梅 ， ， 南京市产品质量监督检验院国家农副产品监督检验中心 南京 （ ， 210028 ） 摘 要 通过调整混合培养基的配比摸索乳制品中金黄色葡萄球菌 沙门氏菌和志贺氏菌的快速共增菌条件 并选择稳定高效的细菌 ： 、 ， 基因组 提取方法 然后根据三种目标致病菌的保守基因分别设计多重 引物 对致病菌进行多重 检测 结果表明 方法具 DNA ， PCR ， PCR 。 ， 有良好的针对目标致病菌的特异性 检测限可达 2 -1 且反应体系各组分间未见交叉干扰 对人工污染的乳品盲样检测验证了方法 ， 10 mL ， 。 的实用性。 关键词 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 志贺氏菌 多重 ： ； ； ； PCR 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） TS252.7 A 1001-2230 2010 04-0050-04 Multiplex PCR method for simultaneous detection of three bacteria in dairy products YANG Jun, ZHANG Chi, LIU Xin-mei (Nanjing Insititute of Supervision Testing on Product Quality, Nanjing 210028, China) Abstract: In the present study, we first optimized conditions for simultaneous enrichment of Staphylococcus aureus, Salmonella spp. and Shigella spp. in dairies, and then selected a stable and efficient method to extract genomic DNA. Subsequently, a multiplex PCR approach was settled, aiming at the conserved genes of target pathogens, respectively. This multiplex RTi-PCR procedure was verified to be specific to the target bacteria without cross interference, and the detection limit was 102 mL-1 for each pathogen. Finally, it was tested in artificially inoculated dairies, revealing a rapid, sensitive and accurate detection of the target bacteria. Key wor