小鼠子宫内膜基质细胞中HOXA10 调控DNM1L - 南京农业大学学报.PDFVIP

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2017-08-16 发布于天津
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小鼠子宫内膜基质细胞中HOXA10 调控DNM1L - 南京农业大学学报.PDF

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小鼠子宫内膜基质细胞中HOXA10 调控DNM1L - 南京农业大学学报.PDF

－　南京农业大学学报　２０１６ꎬ３９(６):１０２３１０２９ｈｔｔｐ:/ / ｎａｕｘｂ.ｎｊａｕ.ｅｄｕ.ｃｎ　ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＤＯＩ:１０.７６８５/ ｊｎａｕ.２０１５１１０３３－肖成ꎬ胡进ꎬ纪红军ꎬ等. 小鼠子宫内膜基质细胞中ＨＯＸＡ１０调控ＤＮＭ１Ｌ表达机制的研究[Ｊ]. 南京农业大学学报ꎬ２０１６ꎬ３９(６):１０２３１０２９. 小鼠子宫内膜基质细胞中ＨＯＸＡ１０调控ＤＮＭ１Ｌ表达机制的研究肖成ꎬ胡进ꎬ纪红军ꎬ牛亚茹ꎬ焦建桥ꎬ戴玉健ꎬ徐银学∗ (南京农业大学动物科技学院ꎬ江苏南京２１００９５) 摘要:[目的]本文旨在研究转录因子同源框Ａ１０基因(ＨＯＸＡ１０)结合动力蛋白基因(ＤＮＭ１Ｌ)启动子区域绑定位点ꎬ并调控ＤＮＭ１Ｌ基因的表达机制ꎮ [方法]通过转录因子网站(ＴＦＳＩＴＥＳＣＡＮ)预测ＤＮＭ１Ｌ启动子区域存在ＨＯＸＡ１０的结合位点ꎮ 分离怀孕１~７ｄ的小鼠子宫内膜ꎬ采用ＲＴ￣ｑＰＣＲ检测其ＨＯＸＡ１０和ＤＮＭ１ＬｍＲＮＡ表达量的变化规律ꎮ 结合ＨＯＸＡ１０过表达和ｓｉＲＮＡ干扰试验ꎬ分析小鼠子宫内膜基质细胞中ＨＯＸＡ１０ｍＲＮＡ表达量的变化如何影响ＤＮＭ１Ｌ表达ꎮ 构建ＤＮＭ１Ｌ－－野生型和绑定位点突变型启动子区域( １７４９~ ２０３３ｂｐ)荧光素酶报告载体ꎬ分别与ＨＯＸＡ１０过表达载体和ｓｉＲＮＡ共转染到小鼠３Ｔ３细胞ꎬ检测ＤＮＭ１Ｌ启动子区荧光素酶活性值变化ꎮ [结果]网站(ＴＦＳＩＴＥＳＣＡＮ)预测ＤＮＭ１Ｌ在转录起始位点－上游１７６７ｂｐ的位置存在ＨＯＸＡ１０转录结合位点ꎮ ＨＯＸＡ１０ｍＲＮＡ表达量在怀孕４ｄ小鼠的子宫内膜中达到峰值ꎬ ＤＮＭ１ＬｍＲＮＡ表达量则在怀孕３ｄ时达到峰值ꎮ ＨＯＸＡ１０过表达和ｓｉＲＮＡ干扰试验结果表明:基质细胞中ＨＯＸＡ１０表达量升高或降低能相对应降低或提高ＤＮＭ１Ｌ表达水平(Ｐ０.０１)ꎮ 双荧光素酶活性试验结果表明:ＨＯＸＡ１０过表达载体和ｓｉＲＮＡ分别与野生型ＤＮＭ１Ｌ报告载体共转染细胞ꎬ前者荧光活性值极显著下降ꎬ后者荧光活性值极显著上升(Ｐ０.０１)ꎮ 突变型ＤＮＭ１Ｌ报告载体对荧光活性值无明显影响(Ｐ０.０５)ꎮ [结论]ＨＯＸＡ１０可结合于ＤＮＭ１Ｌ启动子区域ꎬ并调控ＤＮＭ１Ｌ基因表达ꎮ 关键词:同源框Ａ１０基因(ＨＯＸＡ１０)ꎻ动力蛋白基因(ＤＮＭ１Ｌ)ꎻ小鼠子宫内膜基质细胞－－－中图分类号:Ｓ８５２.２３　　　　文献标志码:Ａ　　　　文章编号:１０００２０３０(２０１６)０６１０２３０７ＴｈｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＨＯＸＡ１０ｏｎＤＮＭ１ＬｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｍｏｕｓｅｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌｓＸＩＡＯＣｈｅｎｇꎬＨＵＪｉｎꎬＪＩＨｏｎｇｊｕｎꎬＮＩＵＹａｒｕꎬＪＩＡＯＪｉａｎｑｉａｏ