抗菌肽A 与抗菌肽B 空间构象的喇曼光谱分析Ξ.PDF

( ) 第 21 卷 第 4 期 南京师大学报 自然科学版 V o l. 21 N o. 4 ( ) 1998 年 JOU RNAL O F NAN J IN G NORM AL UN IV ERS IT Y N atural Science 1998 抗菌肽A 与抗菌肽B 空间构象的 喇曼光谱分析 张双全　余多慰　柯惟中　戴祝英 摘要　通过抗菌肽A 与抗菌肽B 两种分子的粉末固体状态、水溶液状态空间构象的喇曼光谱分 析, 表明这两种抗菌肽具有不同的主链构象, 在固态中分别以无规卷曲、 螺旋为主, 在水溶液中分 别以 螺旋、 结构为主. 两种分子在水溶液中 - 侧链构象分别为扭式与反式. 但色氨酸侧链环 C S 境分析表明, 两种分子在水溶 液中均为色氨酸残基处于部分或完全暴露状态, 这一结论为色氨酸 具有使抗菌肽全分子与细胞膜发生密切接触的初级锚定作用直接提供了证明. 关键词　抗菌肽 , 抗菌肽 , 空间构象, 激光喇曼光谱 A B 分类号　 93992: 65737 Q O 1　引言 ( ) ( ) ( 抗菌肽 Cecrop in 是由瑞典科学家Bom an 等 1975 首先从惜古比天蚕 H yalopho ra Ce crop in ) 蛹诱导分离而得, 它由 37 个氨基酸残基组成, 抗菌肽A 及抗菌肽B 分子量分别为 [ 1 ] 4005 与 4036 . 两种分子具高度的同源性, 除肽链C 端的 5 个氨基酸外, 其它 32 个氨基酸位 点中仅有 8 个氨基酸位点有差异. 有关这两种抗菌肽的空间构象, 已有NM R 及 CD 分析结果 报道[ 2, 3 ] , 均表明在磷酸钠水溶液中具有无规卷曲为主的构象, 而在模拟膜的疏水环境的 15% 六氟异丙醇溶液中, 抗菌肽具有以 螺旋为主的构象. 本文以喇曼光谱分析技术, 对粉末状固 态样品及重蒸馏水溶解状态中的两种抗菌肽分子进行测试, 填补了这两种状态下抗菌肽构象 参数的空白. 结果表明, 抗菌肽A 与抗菌肽B 之间有一定的差异, 在粉末状态下, 分别以无规 卷曲和 螺旋为主, 在水溶液中, 则分别以 螺旋和 结构为主, 本文对此进行了探讨. 2　材料与方法 2. 1　实验材料 抗菌肽A 与抗菌肽B 购 自Sigm a 公司, 产品系人工合成, 分子量分别为 4003. 8 和 3835. 7. 抗菌肽B 比天然样品缺少第 35 位的异亮氨酸和第 37 位的丝氨酸. 2. 2　喇曼测试仪器 喇曼散射测试在Job in Yvon 公司的HRD 2 型双单色仪上进行, 由286 型微机联动控制. 激光光源为Coheren t 公司的 Innova70 型氩离子激光器, 激发波长 514. 5nm. 2. 3　实验方法 双单色仪狭缝宽 500 , 波数扫描速度 1 - 1, 峰值误差不超过±2 - 1 , 激光出射功率 m