实验 纸层析法分离氨基酸.pptVIP

纸层析法分离氨基酸 实验目的 1、掌握分配层析的原理，学习氨基酸纸层析法的操作技术 (包括点样、平衡、展层、显色、鉴定及定量)。 2、学习未知样品的氨基酸成分(水解、层析及鉴定)分析的方法。 实验原理 1、纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析。滤纸纤维上的羟基具有亲水性，吸附一层水作为固定相，有机溶剂为流动相。当有机相流经固定相时，物质在两相间不断分配而得到分离。 2、溶质在滤纸上的移动速度用比移值Rf值表示： 3、Rf=原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离 4、在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨基酸。 实验材料与试剂 实验试剂 1、氨基酸标准液(1mg/mL) 亮氨酸、甘氨酸和脯氨酸标准液。 2、80%甲醇 3、0.1%茚三酮丙酮溶液  4、氨基酸混合液(每种氨基酸500mg/mL)  5、正丁醇 实验器材 1、新华滤纸 2、培养皿 3、电热鼓风干燥箱 4、吹风机 5、毛细管 6、针、线、尺。 7、钟罩(高约430mm,直径约290mm，具磨口塞) 实验操作 标准氨基酸纸上层析 单向上行层析 氨基酸Rf值的测定 A、滤纸：选用国产新华 1号滤纸， 6cm×7cm。在距滤纸2cm处划线