PCR试剂盒-RR820A.pdf

Code No. RR820A 研究用 SYBR® Premix Ex Taq™ II (Tli RNaseH Plus) 说明书 v201508Da 目 录 内 容 页 码 ● 制品说明 1 ● 试剂盒原理 1 ● 制品内容 1 ● 试剂盒外必备主要试剂和仪器 2 ● 保 存 2 ● 使用注意 3 ● 操作方法 3 ● 实验条件的选择 7 ● 附 录 9 ● 关联产品 10 ● 制品说明 本制品是采用 SYBR Green I 嵌合荧光法进行 Real Time PCR 的专用试剂。制品中含有 Real Time PCR 反应的最适浓度 SYBR Green I，是一种2 ×浓度的Premix Type 试剂，进行实验时，PCR 反应液的配 制十分方便简单。 本制品中还添加了 Tli RNaseH(耐热性 RNaseH)，以cDNA 作为模板进行 PCR 反应时，可以最大限度抑 制由于 cDNA 中残存 mRNA 对 PCR 反应造成的阻害作用。 本制品 Buffer 经过改良，使反应特异性比 SYBR Premix Ex Taq(Tli RNaseH Plus) （Code No.RR420A） 更高。能抑制非特异性反应，可以在宽广的范围内进行更加准确的定量。本 Buffer 和 Hot Start 法用 DNA 聚合酶TaKaRa Ex Taq HS 组合使用，可以进行重复性好、可信度高的 Real Time PCR 解析。 ● 试剂盒原理 本制品使用了改良后的 TaKaRa Ex Taq HS 进行 PCR 扩增，通过检测反应液中 SYBR Green I 的荧光 强度，达到监控 PCR 产物扩增量的目的。 1． PCR PCR 法是以微量 DNA 进行目的片段扩增的方法。通过 DNA 链的热变性、引物退火、DNA 聚合酶作 用下引物的延伸三个步骤循环往复，可在短时间内扩增 DNA 达 100 万倍以上。 本制品中的 DNA 聚合酶由于使用了 TaKaRa Ex Taq HS，从而抑制在调制反应液等低温条件下由 引物产生的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增，大大提高 PCR 扩增灵敏度。 2． 嵌合荧光检测法 SYBR Green I 与双链 DNA 结合后发出荧光，所以可以通过检测反应体系中的 SYBR Green I 荧光