不同产地中华马氏钳蝎神经毒素的分离纯化和部分性质比较研究.pdfVIP

维普资讯 一 7 ㈦ 动 物 学 研 究 l995，16 (3)：263 270 CN 53—1040／Q 18SN 0254-5853 ZoologicalResearch 不 同产地 中华马氏钳蝎神经毒素的 分离纯化和部分性质 比较研究 刘延顺 三 鑫 俭 雷 李宏民 王大成 ． (中国科学院生物物理研究所北京100101) 9 、 ． f，Lff 摘变 经SephadexG一50，SpSepbadexC25两次柱层析，从不同产地的东亚马氏钳蝎 h“Ji口 PnsiKarsch)粗毒 中分别得到了一组碱性哺乳动物神经毒素和一种 甲壳类神经毒 素，对它们进行的等电点、分子量、动物毒性等部分性质的研究与比较结果表明，渐川、常德 与益都产的蝎毒无论在柱层析行为上，还是在等电点、分子量、各组分的毒性大小顺序及某些 对应组分的结晶行为上有很大相似性，仅存在略微的差异。 - ， ． ， ． 关键词二竖 丝主墨纯ft 较 蝇 ／ ， ／ 一 ＼— ／ ／ 已知蝎毒液 中的主要有效成份是一组作用于钠、钾离子通道的神经毒素。蝎神经毒素 由一个小分子碱性蛋 白家族组成 (Zen等 ，1985)，它们显示 出明显的序列 同源性，然而毒 性及作用专一性却有很大的差别，因此是研究生物大分子结构与功能的好材料。同时研究 蝎神经毒素结构与功能的关系对了解离子通道作用机理，生物膜 中受体与配体相互作用及 蝎毒作为降血压、抗癞痫、抗惊厥传统 中药的药理作用有重要意义。 目前已知不同种属蝎 神 经 毒 素 间差 异较 大 ，它们 往 往各 自 白成 体 系 。关 于 中华 马 氏钳 蝎 (Buthus rnartensiKarsch，以下简称 BmK)毒素的分离纯化及部分序列的研究虽有一些报道 (王锦 兰等，1985；吉永华等，1983~胡纫秋等，1989~刘建宁等，1988)，但已报道的方法都 不能提供批量纯化并保有括性的样品，因此难以适应晶体结构、NMR结构这样一些深入 研究的需求。特别是蝎的种属变化较大，蝎毒组分复杂，进一步深入研究要求有清晰的生 化基础，而以往的报道 中所用的蝎毒的产地不同，各 自分离方法不同，各 自编号也不同， 结果难 以比较、关联。对 同一种属来 自不同产地的蝎神经毒素间的比较 尚未见报道。其基 本成份是否相 同?在分子水平上是否具有共 同性?这是在结果比较时常遇到的问题。为此我 们选择了来 自山东、湖南、河南、四川的蝎毒粗品，用我们实验室建立的蝎神经毒素活性 样品批量纯化的可靠方法，在相 同条件下对它们进行了分离纯化和部分生化性质及生物学 性质测定，在此基础上进行了比较研究，并在它们的纯化组分间建立 了联系。这对深入了 解我国的蝎毒资源也有重要意义。本文主要报道分离纯化及比较研究结果，以此为基础的 ·国家 自然科学基金资助项 目 · 通信联系^ 奉文 1994年 6月 6日收到，1995年 4月 20日修回 维普资讯 264 动 物 学 研 究 16卷 晶体学研究结果将 另文报道 。 l 材料和方法 l