细胞功能学分析实验概述.PDFVIP

细胞功能学分析实验概述 细胞功能学分析实验概述 一、增殖实验 1. MTT/CCK8 2. BrdU 渗入实验 （需要标记FITC ，和GFP 一般不兼容） 3. Ki67 免疫荧光实验 （需要标记荧光，和GFP/RFP 等荧光标记一般不兼容） 推荐抗体: abcam cat. Ab16667 4. Cellcycle 流式细胞检测实验 5. 克隆形成实验colony forming assay 1） 平板克隆形成试验 （贴壁细胞适用） 2 ） 软琼脂培养克隆形成试验 （悬浮细胞等适用） 二、凋亡实验 1. AnnexinV/PI 双染法检测细胞凋亡 （早期凋亡，需要标记FITC ，和GFP 一般 不兼容） 2. TUNEL 法检测细胞凋亡 （晚期凋亡） 一般采用Roche 的一步法kit ，需要标记FITC ，和GFP 一般不兼容。 3. Caspase3/8/9 Western Blot 检测 4. DNA Ladder （现在极少用） 5. 彗星实验 （现在极少用） 三、迁移、侵袭实验 1. 划痕实验 132 上海市徐汇区斜土路1175 号 E-mail:service@ Tel：021 实验室地址：上海市浦东新区张江高科技园区 蔡伦路720 弄药谷孵化器1 号楼314 细胞功能学分析实验概述 2. Transwell 实验检测迁移 （不需要Matrigel ） 3. Transwell 实验检测侵袭 （需要Matrigel ） 四、内皮成管实验 通过 condition medium 或者 coculture 模型，检测肿瘤细胞对内皮成管能力的影响： HUVEC Matrigel tube formation Model 五、细胞移植动物实验 1. 裸鼠成瘤实验检测成瘤能力 2. 小动物活体成像实验 （需要荧光标记，最好是 Luciferase ，可深度观测，RFP 次之，GFP 效果最差，只有皮下才能检出信号） 3. 移植后的血液/组织液中物质检测 （LDH 等） 六、分子生物学与蛋白实验 1. Western Blot 检测下游通路变化 2. Co-IP （最好带FLAG 或His tag ） 3. 免疫荧光 （与之前的所带的荧光通道GFP/RFP 等不兼容） 七、其他分子探针型细胞功能学检测 1. ROS 检测：DCF 法 （绿光发射波长，和GFP 不兼容）, DHE 法 (红光发射波长， 与RFP 不兼容) 2. 线粒体膜电位：JC-1 （与GFP 、RFP 皆不兼容）；TMRE、TMRM ：（和RFP 不兼容） 3. Ca2+ （Indo-1,Fura-2,FLuo-4 等，和GFP 不兼容） 注：其他探针不一一列举。 如需要详细的实验指导，欢迎登录汉恒生物官网 与汉恒生物--细胞功能 学技术工程师交流探讨更多细胞功能学研究领域。 133 上海市徐汇区斜土路1175 号 E-mail:service@ Tel：021 实验室地址：上海市浦东新区张江高科技园区 蔡伦路720 弄药谷孵化器1 号楼314