先秦及秦汉原创性单味镇痛中药微米粉末喷洒用于肛肠病术后创面镇痛实验探究.docVIP

先秦及秦汉原创性单味镇痛中药微米粉末喷洒用于肛肠病术后创面镇痛实验探究摘 要：目的：评价花椒微米粉末、防风微米粉末对肛肠病术后疼痛的镇痛效果及安全性，并对其镇痛作用机理进行初探。方法：分别采用小鼠热板法及小鼠醋酸扭体法实验来观察实验药物的整体镇痛效果；建立小鼠肛肠病术后疼痛模型，采取酶联免疫吸附试验（ELISA）测定该模型小鼠血清中前列腺素E?2（PGE?2）和β-内啡肽（β-EP）水平，初探微米粉末的镇痛机制；以急性皮肤粘膜刺激实验观察药物外用的毒性与不良反应。结果与结论：先秦及秦汉时期原创性单味中药微米粉末―花椒微米粉末及防风微米粉末对肛肠病术后镇痛是安全有效的，其镇痛机制可能与降低血清中PGE?2含量，提高β-EP含量有关。 关键词：先秦；秦汉；原创性；单味；镇痛；微米粉末；肛肠病术后；实验研究 中图分类号：R243.2文献标识码：A文章编号：1673-2197（2009）02-0029-03 清#8226;孙星衍《神农本草经#8226;卷三#8226;下经#8226;蜀椒》：“蜀菽，味辛，温，主……痹痛……”。清#8226;孙星衍《神农本草经#8226;卷一#8226;上经#8226;防风》：“防风，味苦，温，无毒，主大……疼痹（《御览》作痛）……”。 1 材料与方法 （1）清洁级昆明种小白鼠，雌雄不限，体重为18~22g(由湖南中医药大学动物实验中心提供)，动物合格证：scxk（湘）2004-0005。 （2）实验器材包括三用恒温水箱（浙江省余姚市检测仪表厂生产，浙，高速离心机（长沙平凡仪器仪表有限公司生产，TG16-Ⅱ），AO-820组织切片机（美国生产，湖南中医药大学病理教研室提供），400倍奥林巴斯光学显微镜（日本生产，湖南中医药大学病理教研室提供），Thermo multiskanink3酶标仪（美国热电-芬兰雷勃酶标仪MK3）。 （3）实验药物包括花椒微米粉末（D50=16.89μm，D90=57.94μm），防风微米粉末（D50=7.71μm，D90=32.79μm），由湖南中医药大学教育部工程技术研究中心提供。 （4）实验试剂包括阿司匹林原料药（山东新华制药股份有限公司生产，国药准字号：批号：07200），盐酸曲马多原料药（中国科学院分装，标准：EP 5.0，批号：070227），PGE?2 ELISA试剂盒 （上海森雄科技实业有限公司进口分装，批号：0711111），β-内啡肽 ELISA试剂盒（BPB Biomedicals，Inc.USA，湖南晶科生物试剂有限公司原装进口，批号：70621S），冰醋酸溶液（上海试剂一厂生产，批号：AR500mL 050906），分析纯，临用时以蒸馏水配成0.6％浓度。 （5）实验用药计算参照《中华人民共和国药典》（2005版），花椒临床常用量为5g，防风临床常用量为10g，所有实验药物剂量均以其临床常用量为基准，参照文献［1］方法计算。 （6）小鼠热板法实验：按文献［1］方法取合格小鼠（雌性）180只，随机分为空白组、花椒低剂量组、花椒中剂量组、花椒高剂量组、防风低剂量组、防风中剂量组、防风高剂量组、阿司匹林组、盐酸曲马多组，观测指标及给药方法同文献［2］所述。各组用药量：空白组：生理盐水（1mL/只）；花椒低剂量组：0.015g/只；花椒中剂量组：0.03g/只；花椒高剂量组：0.06g/只；防风低剂量组：0.03g/只；防风中剂量组：0.06g/只；防风高剂量组 0.12g/只；阿司匹林组：0.0016g/只；盐酸曲马多组：0.0002g/只。 （7）小鼠扭体法实验：按文献［1］方法将小鼠162只随机分为9组，各组分组及用药量同小鼠热板法实验，主要观察指标为扭体次数、扭体抑制率，给药方法同文献［1］所述。 （8）肛肠病术后疼痛模型实验：参考Milligan-Morgan痔手术操作方法［4］ 造模，在尾底近端皮肤与粘膜交界处，作尖端向外的倒V字形切口，保持创面约0.5cm×0.5cm大小。随机选取90只造模成功小鼠，分为模型对照组、花椒高剂量组、防风高剂量组、阿司匹林组、盐酸曲马多组与未造模的正常对照组，共6组，分别给药如下：正常对照组：适量面粉；模型对照组：适量面粉；花椒高剂量组：0.06g/只；防风高剂量组：0.12g/只；阿司匹林组：0.0016g/只；盐酸曲马多组：0.0002g/只。给药方式均为用无菌棉签粘取各药粉均匀涂于创面，以纱布覆盖，胶布固定，连续给药3天，每天两次。 （9）小鼠血清中PGE?2和β-EP测定：分别采集肛肠病术后疼痛模型实验中各组小鼠眼眶静脉血，分离血清，测定PGE?2和β-EP值（采用ELISA法）。 （1