四型肽精氨酸脱氨酶在类风湿性关节炎中作用.doc

四型肽精氨酸脱氨酶在类风湿性关节炎中作用文章编号：1009-5519（2008）17-2608-02 中图分类号：R5 文献标识码：A 类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种世界性疾病，是以关节滑膜为主要靶组织的慢性系统性炎症性的自身免疫性疾病，主要侵犯手足小关节。由于关节的慢性炎症，导致关节结构的破坏、畸形和功能丧失，具有较高的致残性。其确切的病因和发病机制至今尚未阐明，目前认为它是多种遗传因素和环境因素共同作用所导致的自身免疫性疾病。RA在自身免疫性结缔组织病中其患病率居首位，全世界的患病率大约为0.5%~1%，成年人发病率大约0.3‰。 在RA患者的血清中存在包括抗类风湿因子（rheumatoid factor，RF）抗体在内的多种自身抗体，它们是造成机体免疫调节紊乱的一个主要原因。在这些自身抗体中对RA诊断最有特异性的抗体是抗含有胍氨酸的肽链或蛋白质的自身抗体。这些所谓的抗胍氨酸化蛋白抗体包括抗丝集蛋白抗体（anti-filaggrin antibody，AFA）、抗角蛋白抗体（anti-keratin antibody，AKA）、抗核周因子抗体（anti-perinuclear factor，APF）和抗Sa抗体（anti-Sa antibody）。抗环状胍氨酸肽抗体（anti-cyclic citrullinated peptide antibody，anti-CCP）也是一种抗胍氨酸化蛋白抗体，对RA诊断有较高的敏感性（41%~88%）和非常高的特异性（＞90%），并且由于它具有较高的可靠性，已经开始在临床上进行应用。此外，这些抗体在RA的早期，甚至RA发病前几年就可被检测到，使RA病人得到及时的治疗。 在人体内，胍氨酸是一种非编码的天然氨基酸，是人体中稀有氨基酸，仅存在于包括丝集蛋白在内的少数几种蛋白中。蛋白质中的所有胍氨酸残基都是翻译后经酶催化，使精氨酸残基脱亚胺基的结果。催化肽链中的精氨酸转变为胍氨酸的酶就是肽精氨酸脱氨酶（Peptidylarginine deiminases，PADIs）。虽然一些生物现象，如炎症、细胞凋亡、损伤和老化，增加了翻译后的胍氨酸合成，但胍氨酸合成的确切生理作用仍不清楚[1]。目前所知道的是胍氨酸合成及其造成的后果是各种蛋白质在胍氨酸化后，由于其随后的结构改变导致免疫耐受的丧失。通过实验也发现，RA病人血清中的抗胍氨酸化肽抗体和自身抗体可以识别脱亚胺基的蛋白质，但却不能识别未胍氨酸化的形式，说明胍氨酸合成后蛋白质的抗原发生了改变。由此可见，PADIs催化的胍氨酸合成在RA的发病机制中起着重要的作用。但是从免疫学的角度来看，翻译后自身抗原的修饰更有可能导致自身耐受丧失的观点仍存在争议。 PADIs是一族翻译后的修饰酶，能催化蛋白质中的精氨酸残基转变为胍氨酸残基。由于酶的脱亚胺基作用，使天然蛋白质分子的阳性电荷丧失，造成它们的结构和功能发生明显的改变。目前已经从几种哺乳动物（包括人类）克隆出5种PADIs亚型（PADI1～4，PADI6）。由于所有PADIs亚型的肽序列都不包含第二信号，它们被认为是细胞内的酶。它们都有一个能与钙结合的结构域，并且它们的酶活性依赖于高浓度的钙离子。由于它们所要求的钙离子浓度比细胞浆内的浓度高得多，因此催化精氨酸残基转变为胍氨酸残基应该在经过严格调节后，具有非常高的钙离子浓度的微环境中进行，或者伴随变性细胞的酶的渗出，在细胞外的环境中进行。各种蛋白质中的精氨酸残基都可被PADIs修饰，但是游离的L-精氨酸不能转变为L-胍氨酸。 编码人类PADIs的基因聚集在染色体1p36区，研究发现该区与RA的易感性有关[2、3]。但是只有PADI2和PADI4显著地在RA病人的滑膜组织中表达[3]。Vossenaar等[4]也报道在RA病人红肿的关节组织中的含有高浓度的PADIs，滑液和滑液的单核细胞中有大量的PADI2和PADI4表达，远高于骨关节炎的滑膜和正常的滑膜。RA病人的滑膜炎主要是由于巨噬细胞的异常增生和大量的淋巴细胞渗透，因此认为RA病人滑膜中高浓度的PADI2和PADI4和它们的酶活性在RA的发病机制起着重要作用。 PADI2和PADI4有不同的组织分布，PADI2的表达相当广泛，没有核内位点信号（nuclear localization signal， NLS），仅在细胞浆中能被检测到；PADI4则比较局限，有一个NLS，在细胞浆和细胞核内都能检测到。由于PADI2和PADI4的组织分布、转录和翻译不同，它们也分别地进行调节。根据细胞系和它们的分化、转录及翻译的阶段进行不同的调节[4]。在稳定状态下，PADI2和PADI4的酶都没有活性。因为PADIs酶需要细胞内具有较高浓度的