壳聚糖对胃溃疡大鼠血清中MDA、SOD及GSH-PX影响.doc

壳聚糖对胃溃疡大鼠血清中MDA、SOD及GSH-PX影响摘 要 目的：观察壳聚糖对大鼠消化性溃疡愈合的影响，探讨其抗溃疡的可能机制。方法：采用冰乙酸胃窦部浆膜下注射法制备大鼠消化性溃疡模型。70只实验大鼠被随机分成7组，即假手术对照组、模型对照组、泮托拉唑治疗组、硫糖铝混悬液治疗组及3个不同剂量壳聚糖治疗组（ 0.25 g/kg,0.5 g/kg,1.0 g/kg）。按Guth标准记分判定溃疡指数并计算溃疡抑制率；HE染色观察组织结构。采用羟胺法测定超氧化物岐化酶(SOD)，DTNB法测定谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)，TAB法测定丙二醛(MDA)。结果：壳聚糖治疗组与模型对照组比较，溃疡指数明显降低，溃疡抑制率升高（P 4 mm记5分；若宽度1 mm，以上分值×2。 溃疡抑制率：溃疡抑制率= (模型对照组溃疡指数- 治疗组溃疡指数)/ 模型对照组溃疡指数×100%。 组织学检查：大鼠胃组织以10%甲醛固定24 h，石蜡包埋，连续切片（4 μｍ），HE染色观察组织结构。 血清学检查：SOD测定方法，采用羟胺法；GSH-Px测定方法，采用DTNB法；MDA测定方法，采用TAB法。? 1.3 统计分析 应用SPSS12.0统计软件，计数资料以 ±s表示。多组间比较采用方差分析，组间差异采用Newman-Keuls法，P值 0.05为差异有显著性。偏态分布计量资料结果用四分位数表示，组间变量比较用多个独立样本比较的秩和检验（Kruskal-Wallis法），P值 0.05为差异有显著性。? 2 结果? 2.1 溃疡指数 如表1所示，各药物治疗组溃疡指数较模型对照组都明显降低 (P 0.01) ,其中又以泮托拉唑治疗组及1.0 g/kg壳聚糖治疗组溃疡指数值最低。 2.2 组织学检查 HE染色：可见假手术对照组大鼠胃黏膜形态规则的黏膜上皮层、固有膜和黏膜肌层，在固有膜内分布有整齐的管状胃腺，接近上皮区域形成胃小凹。模型对照组溃疡灶表面无黏膜覆盖，黏膜下层组织消失，代之以坏死组织及大量炎性细胞浸润，肌层肌纤维结构不清，见有富含毛细血管的肉芽组织，内含有成纤维细胞、炎性细胞及巨噬细胞等，底部有瘢痕形成。各药物治疗组被覆黏膜形态呈现较大的差异：泮托拉唑治疗组和1.0 g/kg壳聚糖治疗组大多数溃疡灶表面被覆黏膜已形成了上皮、固有膜和黏膜肌层，其黏膜厚度与皱襞接近正常黏膜，虽无胃腺形成，但这些组织的被覆确是溃疡愈合的象征；硫糖铝混悬液治疗组和0.5 g/kg壳聚糖治疗组溃疡灶被覆黏膜多形成了完整的上皮和固有膜，但其黏膜厚度略薄；0.25 g/kg壳聚糖治疗组溃疡灶被覆黏膜形态最差，其被覆的薄层黏膜仅见上皮和少量固有膜，且皱襞粗大而不规则。? 2.3 各组大鼠血清SOD、MDA、GSH-Px含量测定 如表2所示，1.0 g/kg壳聚糖组、硫糖铝混悬液治疗组及泮托拉唑治疗组大鼠血清SOD、MDA、GSH-Px值与模型对照组均有显著性差异（P 0.05）；0.25 g/kg壳聚糖组及0.5 g/kg壳聚糖组大鼠血清MDA值与模型对照组比较均有显著性差异（P 0.05），但SOD、GSH-Px值与模型对照组比较均无显著性差异。 3 讨论 氧自由基是具有非偶电子的基团和分子，是正常生化过程中的中间产物。在正常情况下，机体在代谢过程中产生的自由基代谢产物及其清除系统保持着动态平衡；SOD和GSH-Px是清除体内氧自由基的一组重要的酶，其活性下降会导致氧自由基代谢产物在体内的堆积。MDA是氧自由基氧化生物膜多不饱和脂肪酸产生的降解产物。其含量升高，反映了体内氧自由基代谢产物的增多。氧自由基在体内的堆积对细胞有明显的损害作用，可以直接破坏细胞膜和遗传结构，使具有膜结构的内质网、溶酶体及线粒体等结构破坏［12，13］。消化性溃疡的发生也与氧自由基损伤有关，研究证实，在高原缺氧地区，SOD和GSH-Px活性明显降低，而MDA含量显著升高，因此在高原地区消化性溃疡的发病率明显高于平原［14～16］。高静等［17］也发现消化性溃疡患者血中MDA明显升高，而SOD、GSH-PX活性均明显低于正常对照组。 壳聚糖具有抗氧化作用，Tae等［18］研究显示，壳聚糖可通过提高SOD酶的活力减轻四氯化碳介导的肝细胞损害。Anandan等［7］做的实验显示甲壳素及壳聚糖有促进盐酸-乙醇溃疡大鼠的溃疡愈合作用，部分原因在于改善溃疡黏膜的SOD、过氧化氢酶及GSH-Px等的活性。本实验证实1.0 g/kg壳聚糖治疗组可增强大鼠体内SOD及GSH-Px的活性，各剂量组壳聚糖均减少了氧化代谢产物MDA的含量，这意味着壳聚糖可能通过增强抗氧化酶的活性，减轻溃疡局部炎症介导的氧自由基损伤，进