如意金黄散微生物限度检查方法探析.doc

如意金黄散微生物限度检查方法探析[摘要] 目的探讨如意金黄散的微生物限度检查方法。方法按《中国药典》2010年版微生物限度检查法进行验证和试验。结果 经方法学验证实验得出，如意金黄散有抑菌作用，其微生物限度检查计数方法采用培养基稀释法（0.5mL/皿，1∶20的供试液），控制菌检查按培养基稀释法（铜绿假单孢菌采用100mL BL增菌液；金黄色葡萄球菌采用200mL营养肉汤，1∶20的供试液）进行。结论 经验证该微生物限度检查方法适用于如意金黄散的微生物限度检查。 [关键词] 微生物限度检查；验证；如意金黄散 [中图分类号] R286.0[文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2011）19-97-02 Study on the Method of Microbial Limit Test for Ruyi Jinhuang San GAO HongLI KaiZHU Huiqin Ningxia Institute for Drug Control, Yinchuan 750001, China [Abstract] Objective To establish the method of microbial limit test for Ruyi Jinhuang San. Methods The validation test was carried out according to Chinese Pharmacopoeia (Chp 2010). Results The results of validation test showed Ruyi Jinhuang San had antibacterial activity. The culture media dilution method was used as the counting methods for the bacteria, moulds and yeasts (0.5mL/dish, 1∶20 sample solution) and the controlled bacteria detection test. Conclusion This method is feasible for the microbial limit test of Ruyi Jinhuang San. [Key words] Microbial limit test; Validation; Ruyi Jinhuang San 为确保微生物限度检查方法的可靠性和准确性，《中国药典》2010年版规定对微生物限度检查方法需进行验证。目前，绝大多数药品的微生物限度检查方法药典中都未有具体的检查方法，都需要进行验证试验后建立。如意金黄散具有清热解毒、消肿止痛的功效，是国家评价性抽验样品品种之一。为了比较全面地反映此药品的整体质量，确保人民用药安全，另一方面也是为了更好地完成国家评价性抽验样品工作，为国家制定政策提供参考依据，本文对如意金黄散的微生物限度具体检查方法进行了验证和总结，供同行参考。 1材料与方法 1.1仪器 高压灭菌器，恒温恒湿培养箱（32.5℃、25.5℃）。 1.2药品 如意金黄散七个厂家56个批次（样品来自全国各地市售及生产厂家）。 1.3培养基 营养琼脂培养基，玫瑰红钠琼脂培养基。胆盐乳糖增菌液（BL增菌液），营养肉汤或亚碲酸钾肉汤，溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基，甘露醇氯化钠琼脂培养基，pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液。 1.4菌种 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）[CMCC（B）63501]、铜绿假单孢菌（Pseudomonas aeruginosa）[CMCC（B）10104]、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）[CMCC（B）26003]、大肠埃希菌（Escherichia coli）[CMCC（B）44102]、白色念珠菌（Candida albicans）[CMCC（F）98001]、黑曲霉菌（Aspergillus niger）[CMCC（F）98003]。 1.5方法 菌液、供试液制备按中国药典2010年版二部附录ⅩⅢ C[1]进行。 按中国药典2010年版二部附录ⅩⅢ C进行细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证试验、控制菌检查方法的验证试验和样品检验。 2结果 2.1细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证试验结果 2.1.1常规法取如意金黄散七个厂家26个批次的1?10供试液各1mL按常规法进行细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证试验。结果为24批样品大肠埃希菌、