SOP-SC-0001组织样本OCT包埋及冰冻切片制作操作规程.PDF

最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 上海生物样本库 最佳实践规范及标准操作流程 文件汇编 （第二版） 2010年5月 最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 上海生物样本库 质量管理体系文件 文件名称 组织样本OCT包埋及冰冻切片制作操作 编号 SOP-SC-005-01 规程 批 准 人 批准日期 实施日期 组织样本 OCT 包埋及冰冻切片制作操作规程 1.目的 规范组织样本的采集后使用 OCT 复合物进行包埋和制作冰冻组织切片的操 作。 2.适用范围 适用于组织样本采集后进行OCT包埋和制作冰冻组织切片的活动。 3.定义和术语 3.1 组织样本 组织样本是指由捐赠者提供的，专业人员采集的组织，包括肿瘤、病变组织 和其它对照组织（包含近癌组织、癌旁组织、正常组织等）。 3.2 OCT（最佳切割温度）包埋 使用OCT包埋剂对组织样本进行包埋。OCT包埋剂是一种聚乙二醇和聚乙烯 醇的水溶性混合物，其用途是在冰冻切片时支撑组织，以增加组织的连续性，减 少皱折及碎裂。 4.职责 4.1 样本管理员 对切割的组织块进行OCT包埋和制作冰冻组织切片。 5.设备和器材 5.1 个人防护装备 手套、口罩、实验防护服、护目镜及其它相关防护装备。 5.2 容器与器材 1 最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 无菌冻存管、OCT包埋模具、液氮容器、载玻片。 5.3 操作台 专用取材台、冰冻切片机。 5.4 试剂 OCT复合物、液氮。 6.主要流程 6.1 样本要求 6.1.1组织样本采集的过程参见《组织样本采集操作规程》中的具体流程。 6.1.2进行OCT包埋的组织样本大小约0.5×0.5×0.5cm。 6.1.3 应尽量在组织切除后的 30 分钟内快速冰冻 OCT 包埋组织和制作冰冻 组织切片。 6.1.4进行OCT包埋的组织样本在处理前不能使用福尔马林处理，也不能在 组织样本中加入血清。 6.2 组织块OCT 包埋 6.2.1准备好干净灭菌的包埋盒。 6.2.2在包埋盒中滴入数滴OCT复合物，覆盖包埋盒的底部。 6.2.3将需要处理的组织样本放入包埋盒中，根据形状调整组织的位置。 6.2.4加入更多的OCT复合物覆盖组织样本。 6.2.5避免在OCT复合物中产生气泡，去除任何产生在组织样本周围的气泡。 6.2.6 OCT包埋的组织块可进行快速冰冻保存或制作冰冻组织切片。 6.3 OCT 包埋组织块的快速冰冻 6.3.1 OCT包埋组织块的快速冰冻方法参见《组织样本快速冰冻操作规程》 中的液氮法。 6.3.2将快速冰冻的OCT包埋组织块放入冻存管中并贴上标签，转运储存在 -80℃冰箱中，储存的过程和要求参见《样本储存控制程序》和《组织样本储存 操作规程》。 6.4 冰冻组织切片制作 6.4.1选择好的冰冻切片机是保证切片质量的关键，建议使用恒冷箱冰冻切 片机避免外界温度对切片的影响。冰冻切片机的操作按厂商有关说明书操作。 2 最佳实践规范及标准操作流程文件汇