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枯草芽孢杆菌芽孢中的芽孢衣 · 108 · 文章编号：1000—1336(2005)02-0108-03 《生命~ 2oo5年25卷2期 CHEMISTRY OF LIFE 2005，25(2) ●Mini Reviews 枯草芽孢杆菌芽孢中的芽孢衣 刘燕秦玉昌 (中国农业科学学院饲料研究所，北京100081) 摘要： 芽孢衣是赋予芽孢对有机溶剂和溶菌酶的抗性，以及对外界出芽诱导物的感应能力的保护性结构。该文 主要介绍由枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)所形成的芽孢的芽孢衣中已鉴定的主要蛋白质，及其基因表达调控和 应用等方面的研究进展。 关键词：芽孢衣：形态建成蛋白质(morphogenetic protein)；表面展示蛋白质 中图分类号：Q934 芽孢是某些革兰氏阳性细菌用于抵抗不良环 境的休眠结构。从开始形成到结束大约需要8～10 h。在芽孢形成的初期，首先是经历不对称分裂 形成大小不等的两个细胞。大的为母细胞 (mother cel1)， 小的为前芽孢(forespore)。各自包 裹一部分染色体。然后前芽孢内陷进入母细胞， 形成大细胞中包裹小细胞的形式。大小细胞经历 不同的发育过程，前芽孢最终发育为芽孢，而母 细胞则为前芽孢的发育提供营养和结构成分。 收稿日期：2004一l1—30 作者简介：刘燕(1982一)，女，硕士生，E—mail：liuyanllh@yahoo Com ．Cn 芽孢的高度抗性主要依赖于高度脱水的核心 (core)及包裹芽孢的两层结构：皮层(the cortex) 和芽孢衣(the spore coat)。在芽孢衣的组装过程中 基因表达的调控无疑是不可缺少的，但存储于蛋 白质本身或辅助蛋白质的结构信息对蛋白质的正 确定位也起到很重要的作用。已分离出几种指导 其他蛋白质正确定位的形态建成蛋白质：并提出 了芽孢衣的初步组装模型。芽孢衣蛋白质的自我 组装已经成为研究生物大分子自我组装的模型。 芽孢还被用作载体，利用其芽孢衣蛋白质来展示 其他外源蛋白质。 1．芽孢衣的形态和蛋白质组成 病毒载体，即新构建的CRAd、作为阳性对照的 含巨细胞病毒启动子的腺病毒(AdCMV—E1A)及 作为阴性对照的复制缺陷型腺病毒，以比较新构 建CRAd的效力：还需设定检测时间及设定病毒 不同的感染复数(multiplicity of infection，MOI)， 以综合评价其复制水平和溶瘤能力：此外。还要 构建体内实验的动物模型。 临床前评价应包括体外和体内实验两部分。 体外实验在细胞培养基础上进行．如感染病毒后 正常及靶肿瘤细胞成活率分析： 而病毒复制能力 分析则可采用Western 印迹法、空斑测定(plaque assay)及逆转录酶聚合酶链反应技术fRT—PCR) 等。体内实验在构建动物模型后，瘤内注射一定 量的病毒．监测异种移植瘤生长情况并跟踪小鼠 成活期；还需小鼠尾静 脉注射病毒，一定时间 后，取小鼠肝、脾等器官进行组织病理分析以评 价新构建CRAd载体的毒性 m1。 近几年来，CRAd已成为有前途的新型癌症 基因治疗载体。尤其它在临床前实验阶段所显示 出的强有力的溶瘤作用．为实体瘤的治疗带来了 新的希望。而且， 随着对病毒生物学方面知识不 断深入的了解，将引导我们在增强病毒靶向型、 基因转移效率、肿瘤特异性复制的调控及在人体 内的稳定性方面进行更为深入的研究，从而构建 出复制效率更高、特异性更强、应用范围更广的 CRAd载体 参 考 文 献 Kirn D et a1．Nat Med．2001．7：78l一787 Doronin K et af、J Wm ．2ooO．74：6l47— 6l55 Kanerva A et a1．／nt J Cancer,20o4．1l0：475— 480 Nettelbeck DM et a1．Cancer Res，2002，62：4663- 4670 Hallenbeck PL ef af．Hum Gene Ther,l999．1O：l72l— l733 Yu DC ef af．Can cer Res．20o1．6l：5l7— 525 ]akubczak JL et a／．Cancer Res，20O3．63：1490- 1499 Yamamoto M et a1．Gastroenterology．2003．125：l203一l2l8 Kancl#39;va A et af．C,ene Ther,20o4．1l：552— 559 Huang Q et a1．c 抽Cancer Res．2004．10：l439—1445 Irving J et a1．Can cer Gene Th