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细胞分析术半月快讯 第25期 1……. 抗原特异性免疫反应的检测：2006年更新 2…….细胞分析术最新文献及动态摘要 抗原特异性免疫反应的检测：2006年更新 检测抗原特异性免疫应答(MASIR)免疫学研究以及临床应用。除了其他方法之外流式细胞术第二MASIR会议于2006年6月的14日至18日，在希腊的圣托里尼举行，除了以流式细胞术为基础的技术外，其他新兴的技术在应用方面有着不同的复杂程度。这些新颖的方法有希望在众多条件下寻找保护检测传染或接种疫苗试验应答评估免疫缺失病人免疫状况持续监控以及特异性T细胞功能 T淋巴细胞被特异性抗原活化时发挥功能。T细胞结构包括了淋巴细胞不同的特异性，例如他们的T细胞受体(TCR)表达不同的可变区域使它们能够识别抗原的种类(1)。这种不同的结构产生的过程称为基因重排，他们发生于T细胞发生期间并且实质上修改了T-细胞受体基因不能改变(2)。随机剪切和粘贴TCR α和β链不同的片段不同的基因编码，最后在每个T细胞唯一的形式产生一个α和一个β基因重排。该机制最初认为产生了抗体多样性并且认为这也是产生T细胞受体差异的原因(3)。 不同于抗体认为由不连续的蛋白质区域或分子如碳水化合物，脂肪等，TCR只认为是多肽片段（抗原肽）并且出现主要组织相容性复合物（MHC）分子的编码。这要求结果在一个复杂的系统，其中T细胞需和抗原提呈细胞(APC)相互作用，可显示MHC分子的抗原肽。 蛋白质抗原如何切断并且和MHC分子联合来成为特异性的TCR？免疫系统认为有两种类型的抗原：外源和内源性抗原。 图1 CD4Th细胞的抗原特异性活化1: corpusculate抗原(细菌)或可溶性抗原(蛋白质)在吞噬体或内涵体(APC)内包。2:这些酸性液泡被蛋白酶消化。3:产生肽段。4:这些器官与包涵MHC II型分子内质网液泡融合。5, 6: 缩氨酸按照正确的顺序和大小能结合在MHC凹槽并且到APC表面。7: MHC-肽复合物认为是特异性的TCR，稳定CD4分子，它结合在MHC II型分子的区域。CD4 Th细胞活化伴随着细胞因子的大量分泌和细胞的扩增。 外源抗原如细菌带入或注入性蛋白质通过嗜菌细胞或细胞内吞进入APC(图1)。抗原进入通路遇到了蛋白质水解器官，于是发生了蛋白质的分解(5)。通过该系统，MHC II型分子也同时出现并且结合那些结构和大小适和MHC凹槽的合适的肽段。这些MHC-肽复合物最后转移到APC的表面并且作为T细胞受体。T细胞和特定的MHC-肽复合物的TCR发生结合APC出现复合物(它是一个随机的过程，例如通过T细胞的循环，感染过程局部T细胞增多或者通过相关特异性的T细胞的高频率)，随着T细胞增殖出现活化。活化意味着细胞因子的级联扩增，虽然细胞呈指数的增殖，但是导致了特定特异性的T细胞显著增加。作为一个经验来说， 我们可以假设一个假定的初始谱T细胞的数量1:106，随着抗原增殖数量范围1:102。意味着特遇到抗原后的异性T细胞大军发生增加。在抗原攻击被控制后，特异性不能恢复到初始状态，但是保持特定细胞得数量增加(记忆性细胞), 对于万一有抗原攻击发生比较有效(6)。 我们用外源性抗原形成的MHC II分子结合CD4 T细胞(或T辅助性(Th)淋巴细胞)提供参考来简单的解释。这里我们应该指出只有有限的体细胞是表达MHC II型分子（表一），从而能够对Th细胞行使APC的正常功能。APC包括树突状细胞，单核细胞，巨噬细胞和B淋巴树突状细胞。其他细胞类型都是MHC II阴性的，它们通过适当的活化(如γ干扰素(IFN)) 就能成为阳性并且通过这种方法获得APC的功能。 内源性抗原则相反，是在APC内部合成的。他们是一些病毒编码蛋白或者肿瘤抗原或迁移到细胞并且被识别的异源组织相容性抗原。内源抗原因为生理调节机制部分减少。在细胞质内发生蛋白质水解，使得抗原肽有合适的顺序和长度能够结合到MHC I型分子上，然后转移到APC的表面（图二）。因为多数的有核细胞表达MHC I 分子(表一)，所以任何这样的细胞在原则上能够出现对CD8＋杀伤性T细胞(CTL) (7,8)。伴随抗原被识别，CTL被活化呈级联状态，包括了细胞因子的分泌，细胞杀伤性功能和增殖。这可能对消除病毒感染细胞或肿瘤细胞有利，也可能对移植排斥不利(9)。 抗原特异性免疫的分析 很明显很多条件包括感染，肿瘤，自身免疫疾病，移植排斥和移植物抗宿主病(GVHD)CD4＋和CD8＋T细胞阳性或阴性的结果都起重要作用。在一些类型中他们的活化(反应和增殖)应该提高，但是在另外一些中却需要降低。如果我们能够更好的识别抗原对T细胞特异性的数量和功能，就能获得对正在研究的病理学的