5 第四章 兽医生物制品生产基本技术.ppt

第四章 兽医生物制品生产;第一节 菌种与毒种选育技术;一、兽医生物制品菌（毒）种标准;2．遗传学上相对纯一与稳定：;3．免疫原性与反应原性优良：;4．毒力应在规定范围以内：;二、强菌（毒）种选育;;菌（毒）种的筛选内容 ;2．抗原性测定：;3．稳定性测定：;4．综合判定，冻干保存：;三、弱毒菌（毒）种选育;弱菌（毒）种的选育途径和常用方法。;（一）自然弱毒株的选育;例如;（二）经典方法诱发突变弱毒株的选育;1．通过化学途径选育;2．通过物理途径选育;3．通过生物途径选育;（1）适应非易感动物（非自然宿主）：;（2）适应细胞：;（3）杂交减毒：;选择;我国一些弱毒株的育成线路与方法 ;我国一些弱毒株的育成线路与方法;;第二节 细菌培养技术;（二）细菌的营养;2．碳;3．氮;4．盐类;5．生长因子;（三）细菌生长的环境条件;CO2/氧分压;2．温度;3．pH;4．渗透压;二、细菌培养的基本技术;（2）倾注培养法：;倾注培养法;2．厌氧菌的分离培养;（二） 细菌的规模化培养;2．培养时间;3、规模化培养细菌方法：;（2）液体静置培养法;（3）液体深层通气培养法;我国使用的反应缸;② 通气供氧：;③ 控制培养基pH值：;④ 调节培养温度：;⑤ 控制污染：;(4) 透析培养法;其优点是：;（三）细菌计数技术;（1）倾注平板培养法：;（2）平板表面散布法：;（3）微量点板计数法：;2．比浊计数法：;三、培养基;1．水;2．肉肝胃消化肉汤（基础培养基）;肝/胃;3．蛋白胨;4．琼脂;5．明胶;6．酵母浸液;7．抑菌剂;（二）培养基分类 ;按理化性状分类：;按用途分类：;按用途分类：;（三）培养基制造;第三节 病毒增殖技术;;;二、动物增殖病毒技术;三、禽胚增殖病毒技术;不同病原对禽胚的适应性也不同;（二）禽胚接种途径与收获;绒毛尿囊膜接种法;尿囊腔接种法;尿囊液收获方法 ;3．卵黄囊接种法 ;4．羊膜腔接种法;5．脑内接种法;6．胚体接种法;收获;（三）影响禽胚增殖病毒的因素;②母源抗体：;2．孵化技术;②湿度：;③通风：;3．接种技术;防止禽胚污染 ;四、细胞增殖病毒技术;根据培养细胞的染色体和繁殖特性，细???的分类;（2）细胞株(cell strain);（3）传代细胞（continued cell line）;2．细胞培养方法 ;（2）转瓶培养;（3）悬浮培养(suspension cell culture );发酵罐;(4) 微载体培养(microcarrier cell culture);微载体培养的容器;微载体培养;(5)中空纤维细胞培养(hollow fibre cell culture);中空纤维;(6)微囊化细胞培养;3．细胞制备;(2) 传代细胞;(3) 细胞冻存与复苏;保持细胞最大活率，一般采用慢冻快融法。;复苏;4．细胞培养要素 ;(2)血清;血清含量;血清含量;(3) 细胞接种量;(4) pH;pH;(5) 温度;温度;5．细胞培养污染问题;(1) 细菌污染;(2) 真菌污染;(3) 支原体污染;支原体污染影响;支原体污染影响病毒增殖的机制;检测支原体污染的方法;(4) 病毒污染;6.细胞的选择;7.接毒量与接毒方法;病毒接种细胞方法有两种：;8 .病毒增殖指标与收获;收毒;第四节 疫苗制造流程(一)菌苗和类毒素制备工艺流程 ;; (三)病毒性组织疫苗制造工艺流程;(四)寄生虫疫苗制备的工艺流程 ;(四)寄生虫疫苗;（一）致弱虫苗;2．人工传代致弱;体内传代致弱：;（二）抗原苗;2．分子水平寄生虫抗原苗;基本概念;;;