生物学活性测定方法复杂.ppt

（2）宿主细胞DNA 测定方法：采用DNA杂交实验，用固相斑点杂交法，以地高辛标记检测试剂盒或者用同位素标记DNA探针进行测定，必须提供相应宿主细胞DNA标准品。 现行生物制品规程对宿主细胞DNA残留量标准作了相应调整： 由小于100pg/剂量调整为小于10ng/剂量。 宿主细胞DNA只作为一种细胞污染因素不作为一种危险因素。 （3）污染物 产品污染物是指带入的外源性物质而不是生产工艺的一部分，如化学及生化物质(微生物蛋白酶)和/或微生物。 应严格避免污染物，并用合适的认可标准或内控限值来控制其限度。 外源性病毒和支原体污染。 产品相关杂质(如前体、某些降解产物)是在生产和/或贮存过程中产生的分子变异体，这些变异体在活性、有效性及安全性方面与预期产品相比，不占主导地位。 3、产品有关杂质 截短式（Truncated forms），蛋白质/多肽中失去氨 基酸或内部裂解。 去酰胺化，异构化，S－S链误联，氧化形式等。 聚合类杂质，包括双聚体、多聚体。 八、安全性及其他检测项目 无菌试验 热源试验 异常毒性试验 免疫原性检查 水分、装量、pH检测 几种生物技术药物检验项目表 IFNα2b原液 1、蛋白含量 8、宿主菌蛋残留量≤总蛋白质的0.1% 2、等电点 4.0～6.7 9、鼠IgG含量≤100 ng/剂量 3、电泳纯度≥95.0%分子量 19.2Kg±10% 10、残留外源性DNA ≤10ng/剂量 4、HPLC纯度≥95.0% 11、残留抗生素活性 5、紫外光谱扫描应为 278nm±3nm 12、细菌内毒素含量≤10Eu/300万IU 6、比活性≥1.0×106IU/mg 蛋白 13、无菌试验 7、肽 图 几种生物技术药物检验项目表 IFNα2b粉针剂 IFNα2b注射液 1、外观性状 1、外观性状 2、PH值 6.5～7.6 2、PH值 6.5～7.6 3、水分≤3.0% 3、装量≥1.0ml 4、无菌试验 4、无菌试验 5、热源试验均低于0.60℃总和不超过1.40℃ 5、热源试验均低于0.60℃总和不超过1.40℃ 6、效价测定 标示量80%～150% 6、效价测定 标示量80%～150% 7、异常毒性 7、异常毒性 几种生物技术药物检验项目表 IFNα2b 栓剂 IFNα2b乳膏 IFNα2b滴眼液 外观性状 外观性状 外观性状 重量差异±7.5% 装量检查每支装量不得低于标示量的93% PH值 5.0～6.0 效价测定80%～150% 效价测定80%～150% 效价测定80%～150% 细菌≤100个/克 细菌≤100个/克 无菌试验 霉菌≤10个/克 霉菌≤10个/克 装量检查每支装量不低于标示量的93% 铜绿假单胞菌不得检出 铜绿假单胞菌不得检出 鉴别试验 金黄色葡萄球菌不得检出 金黄色葡萄球菌不得检出 栓剂融变时限＜60分钟 鉴别试验 鉴别试验 几种生物技术药物检验项目表 重组人生长激素原液 重组人生长激素粉针剂 外观性状 外观性状 含量及高分子蛋白≤4.0% PH值6.5～8.5 总相关蛋白含量≤10.0% 总相关蛋白含量≤13.0% 无菌试验 无菌试验 泳迁移率 电泳迁移率 肽 图 水分≤3.0% 细菌内毒素含量≤5Eu/ mg 细菌内毒素含量≤5Eu/ mg 含量及高分子蛋白含量90.0%～110.0% ；高分子蛋白≤6.0% 由免疫细胞及非免疫细胞 经刺激而合成、分泌的一类具有多 种生物活性的小分子蛋白质 第二节、细胞因子（Cytokine） 已批准上市的细胞因子生物技术药物 名称 适应症 IFNα 白血病、Kaposi肉瘤、肝炎、癌症、AIDS IFNγ 慢性肉芽肿、生殖器疣、过敏性皮炎、感染性疾病、类风湿关节炎 G-CSF 自身骨髓移植、化疗导致的粒细胞减少症、 AIDS、白血病、再生障碍性贫血 GM-CSF 自身骨髓移植、化疗导致的血细胞减少症、 AIDS、再生障碍性贫血、 Epo 慢性肾衰导致的贫血、癌症或癌症化疗导致的贫血、失血后贫血 IL-2 癌症、免疫缺陷、疫苗佐剂 IFNβ 多发性硬化症 IL-11 放化疗所致血小板减少症 干细胞因子(SCF) 与G-CSF联合应用于外周血干细胞移植 EGF 外用药治疗烧伤、溃疡 bFGF 外用药治疗烧伤、外周神经炎 细胞因子的来源 活化的免疫细胞：淋巴细胞尤其是T细胞、单核细胞/巨噬细胞、粒