出生前暴露甲基对硫磷及氯氰菊酯混配农药对大鼠子代神经行为毒性影响.docVIP

出生前暴露甲基对硫磷及氯氰菊酯混配农药对大鼠子代神经行为毒性影响摘要： ［目的］ 探讨出生前甲基对硫磷与氯氰菊酯混配染毒，对大鼠子代神经行为发育的影响。 ［方法］ 48只Wistar孕鼠随机分为4组，于妊娠第1～15天用农药甲基对硫磷与氯氰菊酯进行连续灌胃染毒，对照组采用溶剂灌胃。甲基对硫磷剂量分别为：0，0.023 0，0.072 5，0.230 0 mg/kg体重；氯氰菊酯剂量分别为0，0.800 0，2.526 5，8.000 0 mg/kg体重。甲基对硫磷与氯氰菊酯采用等毒性混配，即分别为：0、1/300 LD50、1/95 LD50、1/30 LD50，对349只仔鼠进行早期神经行为发育指标的测试；对64只仔鼠进行Morris水迷宫空间学习和记忆能力的测试。 ［结果］ 仔鼠断崖回避达标率在出生的第5、6天，高、中剂量组低于对照组（P 0.05）。 ［结论］ 大鼠孕期暴露于甲基对硫磷与氯氰菊酯混配农药，对仔鼠的神经行为发育可产生一定的影响。 关键词：甲基对硫磷；氯氰菊酯；神经发育；Morris水迷宫；空间学习和记忆 文章编号:1006-3617(2007)01-0046-04 中图分类号:R114 文献标识码:A 有机磷农药和拟除虫菊酯类农药都具有神经毒性，有资料表明大鼠发育的关键时期，较低剂量的滴滴涕（DDT）、拟除虫菊酯、有机磷类、百草枯等农药的暴露，就可导致成年后大鼠脑功能的不可逆改变，如引起学习障碍［1］；SD大鼠孕期暴露于七氯杀虫剂，雌性仔鼠在平面翻正实验暴露组落后于对照组［2］。本研究于大鼠妊娠期暴露于甲基对硫磷和氯氰菊酯混配农药，观察其对仔鼠神经行为发育的影响。 1 材料和方法 1.1 受试物 氯氰菊酯原油（cypermethrin），纯度87%，甲基对硫磷原油（methylparathion），纯度80%，均由昆明市农药厂提供，溶剂为市售色拉油。 1.2 动物分组及染毒 健康3月龄清洁级Wistar大鼠由上海科学院动物研究所提供，合格证号：SCXK（沪）2003-0008。雌鼠70只，体重120～200 g，雄鼠30只，体重150～220 g。雌雄以1∶1于每晚6：00时合笼，次日晨进行阴道涂片检查，凡查出精子者确定为已交配，当日定为受孕“0”天。将孕鼠48只随机分为4组，每组12只，于妊娠第1～15天用农药甲基对硫磷与氯氰菊酯混配进行连续灌胃染毒，对照组采用等容量溶剂灌胃。剂量设定：根据本研究前期实验结果［3］，按对数递增（高剂量为中剂量的3.16倍，中剂量为低剂量的3.16倍）设计3个剂量组，具体见表1。 1.3 仔鼠早期神经行为发育指标 对出生的349只仔鼠分别测试断崖回避、平面翻正、前肢悬挂、空中翻正、听觉惊愕、视觉定位指标。上述6项指标开始测试的时间分别为仔鼠出生后第2、2、14、12、7、16天，连续观察记录，计算各剂量组仔鼠达标率即达标仔鼠的数量与测试仔鼠数量之比。 1.4 Morris水迷宫测试 从各剂量组50天龄的仔鼠中随机抽取16只（雌雄各半）共64只放入由一个直径为180 cm圆柱形水池中。水池中加入27 cm深的清水，水温控制在26～28 ℃。一个直径为10 cm可移动玻璃平台，按顺序在池边标注东、南、西、北。 1.4.1 隐蔽平台实验（Hidden platform） 实验平台置于西南象限，距盆边25 cm，在水面下2 cm，水下平台实验共测试5 d，每天测试1次，每次测试仔鼠从4个方向入水，投放的方向由随机数字表确定，将仔鼠面对盆壁放入水中，实验人员在放入仔鼠后迅速离开迷宫室，同时启动电脑轨迹记录开关，记录仔鼠寻找平台的时间（逃避潜伏期，escape latency），仔鼠找到实验平台后，让仔鼠在实验平台上停留30 s后，本次实验确定的最大潜伏期定位为120 s。 1.4.2 可视平台实验（Visible platform test） 隐蔽平台实验结束后的第2天开始，将实验平台升高4 cm，用白色胶布贴附在平台边缘上，使其标志成白色，此实验共测试2 d，每天测试1次，每次测试仔鼠从4个方向入水，记录仔鼠找到平台的时间。 1.4.3 空间探索实验（Spatial probe） 实验共测试1 d，在仔鼠做完可视平台实验的当天，撤除实验平台，把仔鼠从东和北两个方向分别入水，记录仔鼠1 min内在各个象限的停留时间。 1.5 统计分析 实验数据采用SPSS 11.5统计软件包进行处理，根据资料分布情况分别采用：重复测量方差分析、χ2检验、秩和检验、两因素方差分析。 2 结果 2.1 仔鼠早期神经行为发育 表2表明，断崖回避达标率在出生第5和第6天，高、