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江苏省高等学校大学生创新创业训练计划项目 中期检查报告 学 校 东南大学成贤学院 项目编号 Scx1308 项目名称 模拟胃液下柿叶提取物对亚硝酸盐清除作用的研究 项目负责人 缪将能 项目级别 （） 重点项目 、（ ）重点自筹项目 、（ ） 一般项目 、（√）指导项目 一、项目进展情况及取得成果（按照项目研究工作计划逐一对照填写） 项目进展情况 （√）按计划进行、（ ）进度提前、（ ）进度滞后 主要研究阶段 (起止时间) 研究内容 完成情况 9月-10月 采摘柿叶，购买药品，完善研究方案 完成 10月-12月 柿叶提取物的提取工艺 完成 10月-12月 柿叶提取物对亚硝酸盐清除作用的测定 完成 项目研究成果（已取得的成果） 序号 项目成果名称 成果形式 ① 亚硝酸钠的标准曲线的测定 书面 ② 柿叶提取物 实物 ③ 初步建立提取物亚硝酸盐清除率的测定方法 书面 二、中期检查报告（项目执行的进展情况，取得了哪些成绩，是否达到预期效果，以及在项目的开展过程中还存在哪些问题，3000字以内） μg/ml的NaNO2标准溶液，分别准确吸取0ml，5ml，10ml，15ml，20ml，25ml的NaNO2标准溶液于50ml容量瓶中，依次先滴加2ml的 0.4% 对氨基苯磺酸溶液，再滴加1ml的 0.2% 盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min，于540nm处测定吸光值。 实验结果 以吸光值作横坐标，以NaNO2浓度（μg/mL）作纵坐标，得标准曲线如下图所示 并利用计算机做了数据的相关性分析， 回归方程为 y=0.2326x+0.0216，相关系数为 R=0.9954，结果表明本方法的线性关系较好,在此操作下测定的数据可信。为后期的柿叶提取物对亚硝酸盐清除率的测定奠定了基础。 2.已摸索出较合适的柿叶提取物的提取工艺 捣碎柿叶，料液比为1:10,乙醇浓度为70%，温度为85℃，以及使用旋转蒸发仪提取最终产物，柿叶提取物的收率为6.5mg/g 3. 初步建立了提取物亚硝酸盐清除率的测定方法 提取获得最终产物黄酮类的化合物，并保留了中间各组分的柿叶提取物的溶液。对终产物及中间组份分别进行了亚硝酸盐清除作用的测定，发现上述所有提取物均具有不同程度的亚硝酸盐清除作用，其中最终产物对亚硝酸盐清除率最高，可超过90%，达到预期效果。 存在的问题： 1.柿叶提取物中最后旋蒸提取的黄酮类化合物的质量量太少，还含有少量的水，其黄酮物质的含量尚未测定。 2.柿叶提取物浓度如何选择，才能保证测出来的吸光度在合理的范围之内（0.3-0.7之间），使实验结果更准确。 解决措施： 1.进一步优化柿叶有效成分提取工艺：如增加提取次数，改变配料比，乙醇浓度，反应温度等，并采用超声辅助提取法提高有效成分的提取率。 2.通过多次实验，进一步优化亚硝酸盐清除率测定方法的条件如提取物添加浓度等，控制所测的吸光度的范围，提高检测方法的准确性和可靠性。 3、建立提取物总黄酮含量的测定方法，探索黄酮含量的高低是否与亚硝酸盐清除作用存在相关性。 三、经费使用明细情况 项目获批总经费： 3000 元 已使用项目研究经费： 447.8 元 已报销金额： 447.8 元 未报销金额： 0 元 项目经费开支情况 名目 用途 金额 备注 论文版面费 专利申请费 调研、差旅费 打印、复印费 资料费 试剂等耗材费 实验消耗 447.8 元器件、软硬件测试、小型硬件购置费 其它 四、项目后期具体工作计划 1.考察模拟胃液下柿叶提取物对亚硝酸盐的清除作用的影响因素。 ①柿叶提取液浓度对亚硝酸盐清除率的影响试验 ②反应时间不同对亚硝酸盐清除率的影响试验 ③亚硝酸盐含量对亚硝酸盐清除率的影响试验 2. 柿叶提取液与维生素C对亚硝酸盐清除率的对比实验 针对实验画出清除率随浓度变化的曲线图，从而得出柿叶提取液对亚硝酸盐清除作用的强弱 五、指导教师意见：（包括项目的组织实施、进度、预期效果、经费使用等情况） 项目组成员工作认真，态度积极，进度正常，已经初步建立柿叶提取物的提取工艺及亚硝酸盐清除率测定方法，并发现柿叶提取物有较好的亚硝酸盐清除作用。希望学生能够继续刻苦钻研，深入思考，细心实验，加快进度以达到最终目标。 指导教师签字：张亚安 2013 年 12 月 18 日 六、学校审核意见： 年 月 日 中期检查结果类别 （请在对应结果中打“√”） 通过 限期整改