红皮花生种子生活力测定改良.docVIP

红皮花生种子生活力测定改良摘 要：通过改良的TTC染色法，测定花生种子生活力。结果表明，在相同的温度下染色，TTC浓度越高染色效果越好。在相同的浓度下，温度越高，染色效果越好。随着染色时间越长，浓度越高，不同温度下所染色的种子差异越小。此方法可推广应用到红皮花生种植的生产实践当中。 关键词：红四氮唑；花生种子；生活力 花生是我国重要油料作物和经济作物之一，是全世界公认的健康食品，在我国花生被认为是“十大长寿食品”之一。多数专家认为，花生红衣能抑制纤维蛋白的溶解，增加血小板的含量，改善血小板的质量，改善凝血因子的缺陷，加强毛细血管的收缩机能，促进骨髓造血机能。对各种出血及出血引起的贫血、再生障碍性贫血等疾病有明显效果。它可以避免血小板聚集，会对预防中老年人最大杀手心血管疾病有一定的作用。红皮花生种子成熟后，必须经过一段时间的后熟才能发芽。其发芽率存在比较低的现象，主要原因是红皮花生有较长的休眠期。处在休眠状态的种子虽然不能萌动，但是仍然具有生活力，但暂时不能发芽。在调种、引种时常因为时间紧迫急需在短期内了解种子生活力，用普通的发芽实验比较难了解花生的真实发芽力，必须采用1942年，德国的莱康（G.Lakon）发明的TTC染色法快速测定花生种子生活力。在一些基层生产单位和个体育苗户因为缺少设备无法得知种子的生活力从而通过加大播种量的途径来保证单位面积的产苗量，这样会带来不必要的经济损失对生产造成一定的影响。采用以下的化学方法，通过各种比对实验探讨不同浓度的TTC和环境温度对红皮花生种子生活力测定的影响，确定最佳的TTC染色浓度和环境温度，为基层生产单位在缺少设备条件下提供准确测定红皮花生种子生活力的方法。给生产或种子贸易过程提供十分快速而又可靠的结果。这个方法可以确定红皮花生种子的生活力，就可以创造良好的条件大面积播种，增加花生的产量为实现农业生产稳步增长，推动农村经济发展做出贡献。 1 材料与方法 1.1 红皮花生种子来源 本试验所用材料有：红皮花生由大桥镇农户2011年收获提供。试验中使用的正对照是红皮花生去种皮，正常发芽率高达100%，负对照是煮沸10min失活的红皮花生种子。 1.2 试验仪器设备和药品 恒温箱、培养皿、镊子、刀片、烧杯、0.1%TTC溶液、0.5%TTC溶液、1%TTC溶液 试验方法。①浸种：将待测红皮花生种子用冷水浸泡12h或是用温水（30~35℃）浸泡2~6h，使种子充分吸胀。②显色：随机取吸胀种子，小心剥去种皮，务必不要伤害种胚，用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半，将其中的一半置于培养皿中，然后将处理好的种子置于培养皿中，每皿25个半粒，加入 TTC溶液以覆盖种子为度，然后置于3个温度处理即25℃、35℃恒温箱和常温。另取吸胀种子，去皮用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半，将其中的一半置于烧杯中放在电炉上煮沸5min后，然后用3种浓度TTC溶液染色作为对照观察。每试验处理用25粒种子，重复4次。在一定时间下取出种子，观察染色情况并统计种子的生活力。 种子的生活力=胚被染为红色的种子数目/观察的种子数目×100% 2 结果与分析 2.1 不同温度和染色时间对TTC染色效果的影响 在最适的酶促反应温度下，酶的活力最大，反应速度最快效果也最明显。结果表明，在25℃、35℃和常温下对照均没有染色，说明煮熟的种子没有生活力。而处理种子的染色反应非常明显，生活力高达100%。 使用的材料是2011年收获的红皮花生种子，25℃的显色反应比较慢，随着TTC的浓度越高染色的种子数越多。6h前未检测到最高和稳定的染色率，12h后达到最高点，种子颜色很红。对照是用煮熟的种子染色，因没有生活力，没有染色。在35℃的显色中，明显比25℃的显色反应比较快。用0.5%和1%的TTC浓度染色2h就能达到最高百分点，反应2~48h之间生活力稳定在100%。3h时检测到最高和稳定的染色率，6h后达到最高点，种子颜色很红。对照还是零。在45℃的显色中，浓度越高显色越快，1%TTC 染色半小时就达到最高点，2h后就能达到最高百分点。3 h后达到最高点，种子颜色很红。常温下的显色反应比较慢，48h内检测到最高和稳定的染色率。 由此可见随着温度越高、TTC浓度越高染色的速度也越快。45℃应该是红皮花生种子染色的最佳温度。 3 结论 使用不同浓度的TTC溶液，在几种温度条件下对红皮花生种子进行生活力的测定。结果表明，在相同的温度下，TTC溶液浓度越高染色效果越快越好。当TTC溶液浓度相同的情况下，温度越高染色效果越好。随着染色时间延长，被染色的种子越多，不同温度下的染色差异越小。 在有恒温条件下，35~45℃范围内的染色效果最佳，0.5%的TTC溶液在2h