抗癌药物体内外抑癌效应比较.docVIP

抗癌药物体内外抑癌效应实验方法和比较 背景：癌症多发，是严重影响人类，抗癌药物是热点，内体外实验可能会有不同结果，细胞培养是它是一个“简单，稳定”的模型，缺点是这是一个在完全非生理状况下的细胞研究，在体内椎间盘细胞周围有大量的细胞外基质，只有及少数的细胞间联系，这与细胞培养系统不同。 抗癌药的研究需要体内外试验的支持。 目的：总结判定抗癌药物有效性常见的体内体外实验技术，并对体内试验的必要性进行探讨从而得出：生存素反义脱氧寡核苷酸治疗喉癌的体内外实验生存素反义寡核苷酸具有诱导喉癌细胞凋亡和体内抗肿瘤的作用,提示反义核酸技术可作为一种治疗手段应用于喉癌的基因治疗. Faropenem is ineffective in vivo to MRSA, even when it was sensitive in vitro. 罗涛. 注射用法罗培南钠对金葡菌的体内外抗菌活性研究. 生物等效性 后者即本试验的全身血循环药代模型[ 2]。分析认为:缓释顺铂植入剂的有效药物组分顺铂为水溶性药物, 其脂肪分布, 骨胳沉积及血脑扩散相对很弱。缓释顺铂植入剂更是因为其缓释特性显著, 成为限制机体对顺铂的吸收、 消除的第一要素, 使得其二房室(周边室)特性非常不明显,故能被 A IC法选择为一房室。此外实践中发现: 对植入剂局部吸收位给 体外实验释放模型为一级方程，摇瓶法（改良大杯法） 王世亮，刘华顶，等. 顺铂植入剂植入给药的体内外相关性. 中国新药杂志2010,19（20） HPLC测定释放介质中盐酸噻吩诺啡的含量 直接释药 透析释药 皮下注射后收集残余药量 释放速度的体外实验方法。无论是采用透析法还是直接释药法，都可以获得较好的体内外相关性。两种方法在相同时间体内释药百分数都明显高于体外释药百分数，尤其是在释药初期。这可能是由于体内的脂质或其他生理活性物质作用，有利于水分被摄取于聚合物中而导致聚合物的降解速度加快¨1。此外，体内的快速降解还可能与外源性抗体反应有关2。外源抗体周围的巨噬细胞聚集在微球注射部位，形成屏障。外源性抗体反应过程中产生的自由基、酸性物质或者由这些细胞产生的酶可以加速PLGA降解3。。 [3] Menei P，Daniel V，Montero M C．et a1．Biodegradation and brain tissue reaction to poly(D，L-lactic-co．glycolicaeid)miemspheres[J]．Biomaterials．1993。14：470． [4] Ali S，Doherty PJ，Williams DF．Molecular biointeraetions of bio-medical polymers with extraeellular exudate and inflammatoryceHs and their effects on the biocompatibility，in vivo[J]．Bioma—terials，1994。15：779． [5] 符旭东，高永良，平其能，等．石杉碱甲缓释微球的体外释放度及其体内外相关性研究[J]．医药导报，2005，24(11)： 杨 阳，高永良. 盐酸噻吩诺啡缓释微球的体外释放度及其体内外相关性研究. 药学实践杂志2010.9.25 第28卷第5期.369 各类缓释片体外释放和体内吸收的关系。转篮法 测定血药浓度 体内外相关性 抗癌药物分类：1基因治疗 2 干扰素治疗() 体外抑癌效应实验： 1 制模并检验：选用相应的肿瘤细胞系，根据抑癌药物类型选择作用方式。直接给药，可采取脂质体导入寡核苷酸，或白细胞介素感染细胞系，导入细胞内的。可通过四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,TMM]法检测48 h后逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测生存素基因表达,Western Blot检测蛋白表达;细胞凋亡原位检测(terminal deoxynucleotide mediated nick end labeling,TUNEL)法和流式细胞仪检测细胞凋亡情况TMplasmid Giga 试剂盒进行大量抽提。制备的质粒内毒素水平均经过鲎试验测定, 符合动物实验标准。 1. 2. 3
脂质体制备
体积比为3 ? 1 的氯仿和乙醇将摩尔比为 1 ? 1 的 1, 2
二油酰
3
三甲胺基丙烷( DOT AP) 和胆固醇( CHOL ) 溶解, 将混合物置于