腺苷脱氨酶化学检测及临床应用.docVIP

腺苷脱氨酶化学检测及临床应用【摘要】 腺苷脱氨酶(ADA)是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，广泛分布于人体各组织中，测定血液、体液中的ADA水平对某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究日趋受到临床重视。现就ADA的检测方法与临床应用展开综述。 【关键词】 腺苷脱氨酶；肝炎；结核性胸、腹膜炎；结核性脑膜炎 1 腺苷脱氨酶(ADA)的来源与生物学功能 腺苷脱氨酶(ADA)为一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶，属于巯基酶，每分子至少含2个活性巯基，其活性能对氯汞甲酸完全抑制［1］。其作用是催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，其代谢缓和终产物为尿酸。 ADA广泛分布于人体各组织中，以胸腺、脾和其他淋巴组织中含量最高，肝、肺、肾和骨胳肌等处含量较低。血清中ADA主要来源于肝脏，是反映肝损害的重要指标之一。目前ADA检测试剂已经标准化，可应用全自动生化分析仪进行检测，准确快速。 2 腺苷脱氨酶(ADA)的检测标本与方法 2.1 检测标本 采集患者空腹静脉血3 ml,分离血清，在采血过程中应尽量避免溶血； 采集患者胸腹水标本放入抗凝管中，如有浑浊或细胞，离心取上清液； 采集患者脑脊液标本，如有浑浊或细胞，离心取上清液。 2.2 检测仪器与试剂 我院采用全自动生化分析仪HITACHE 7600-020进行检测，试剂由四川迈克公司提供。 2.3 检测原理 腺苷在ADA作用下脱氨基形成黄苷，黄苷在PNP作用下生成次黄嘌呤，次黄嘌呤在XOD作用下转化为尿酸和过氧化氢(H2O2)，H2O2与EHSPT和4-AA在POD作用下生成醌色物，560nm处测定其吸光度，吸光度变化率与ADA活性成正比。ADA活性用U/L表示，用速率法监测吸光度升高的速率从而计算出标本中ADA的含量(U/L)。 3 腺苷脱氨酶(ADA)的检测在肝脏疾病方面的临床意义 3.1 急性肝损伤时的应用 急性肝炎(AH)时ADA仅轻、中度升高，且阳性率明显低于谷丙转氨酶(ALT)；重症肝炎发生酶胆分离时， ALT正常或轻度增高， ADA明显升高；AH后期，ADA升高率高于ALT，其恢复正常时间与组织学恢复一致，也较ALT为迟［2］。因此， ADA更能反映急性肝脏损伤，并有助于探测AH的转归与进展。ALT恢复正常而ADA持续升高者，常易复发或易迁延为慢性肝炎。 3.2 慢性肝病时的应用 慢性肝损伤时测定ADA的价值尤为明显。慢性肝炎(CH)、肝硬化和肝细胞癌患者血清ADA活性显著升高，其阳性率达85%～90%。此期间ALT多正常或轻度升高，因此，同时测定ALT和ADA更具有临床价值，可作为慢性肝病的筛选指标，另外，失代偿期肝硬化ADA活性明显高于代偿期肝硬化，因而可判断慢性肝病的程度；慢性活动性肝炎(CAH)ADA活性明显高于慢性非活动性肝炎(CPH)，故可用于二者的鉴别诊断。 3.3 鉴别黄疸时的应用 阻塞性黄疸时ADA不升高，而肝细胞性黄疸时ADA活性升高，因此测定血清ADA有助于黄疸类型的鉴别诊断。 3.4 其他 阿米巴肝脓肿(ALA)时ADA活性明显减少。 4 胸腹水腺苷脱氨酶(ADA)检测的临床意义 4.1 胸腹腔积液ADA活性测定，可作为鉴别结核性与癌性胸腹水的指标 结核性胸膜炎及结核性腹膜炎患者胸腹腔积液中ADA活性明显高于癌症患者，且前者胸腹水ADA与血清ADA的比值大于1，所以测定胸腹水和血清ADA活性及比值是诊断结核性胸膜炎和结核性腹膜炎的一项可靠有效的指标。 4.2 胸水ADA 可作为结核性胸水疗效观察的指标 胸腹水ADA检测可作为结核性胸、腹膜炎治疗过程中的疗效观察，随着病情好转，ADA活性会明显下降。 5 脑脊液腺苷脱氨酶(ADA)检测的临床意义 脑脊液腺苷脱氨酶检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标。结核性脑膜炎显著升高，病毒性脑膜炎不升高，颅内肿瘤及中枢神经系统白血病稍升高［3］。 6 小结 腺苷脱氨酶作为近年来各医院检验科广泛开展的项目，其测定方法灵敏度高、精密度好、结果准确快速；对临床疾病的诊断、鉴别和监测指导意义明显。但是，要注意测定ADA活性时有一定的假阴性、假阳性结果，因此，需结合临床表现，影像学检查等以准确诊断。 参 考 文 献 ［1］ 叶应抚，王毓三.全国临床检验操作规程. 东南大学出版社，2006：429-431. ［2］ 王静. 中国实用医药, 2011,23:84-85. ［3］ 周美霞，管茶英，陈肖燕.全自动酶联法测定腺苷脱氨酶.临床检验杂志，2004，22(5)：338-340. 1