红细胞血型检测课件.ppt

输 血 前 检 查 ;主要内容;第一节 输血前免疫血液学检查;输血前检查的主要程序;受血者病史和血样的检查、核对及处理;为什么输血前检查用血清比血浆更好？;ABO正反定型不符分析基本程序;复检正定型血型结果的准确性，纠正漏检、误报 亚型 能够纠正因疾病原因造成的红细胞抗原减弱造成的血型错误 排除获得性抗原（如类B抗原）和冷凝集现象对红细胞定型的干扰 不规则抗体 ;错加试剂或标本;(1) 假凝集（串钱状凝集）;(2) 冷凝集（自身凝集）;高效价冷凝集素患者的血型鉴定及配输血的处理1 临床资料　　患者，女，56岁，贫血，Hb30g/L，该患皮肤苍白，呈极度贫血貌，需输血治疗，血型鉴定为AB型，但与AB型交叉配血分歧。2 ABO定型　　重新血型鉴定，正定型为AB型，反定型ABO均凝集，该患者无输血史，考虑可能为冷凝集素所致。 逐将做血型之玻片置于37℃温箱，10min后观察可见：抗B侧凝集颗粒变小，抗A侧不变；升温至45℃，抗B侧凝集消失，抗A测不变。取出室温1min后，抗B侧复又出现凝集，初步定型为A型；用37℃盐水将患者RBC洗涤3次，做正定型为A型；将洗涤RBC 1份加患者血清内的冷凝集素用自家吸收后的血清做反定型，也为A型。; 3 血清冷凝集效价测定　　患者不同稀释浓度的血清与洗涤后的O型RBC做玻片凝集试验，室温时测得冷凝集效价为1:2000。4 配血及输血　　用A型血按常规方法做盐水配血试验，主侧出现凝集次侧因该患RBC自家凝集成颗粒状，不能进行。用37℃盐水洗涤后的RBC配成0.05L/L的RBC悬液与A型血清做次侧交叉，无凝集及溶血。用前述自家吸收后的血清与A型RBC做次侧交叉，无凝集及溶血。交叉显示可以输血，考虑该患冷凝集素效价太高，要求临床保温输血，室温控制在25℃～30℃。输A型血200ml，无不良反应。后按同样方法两次继续输A型血800ml 。患者均无不良反应。因本地缺免疫抑制药，患者自行出院往北京，在中日友好医院诊断为冷凝集素引起的免疫性溶血性贫血。经北京红 十字中心血站鉴定冷凝集素为抗－I。 ;5 讨论　　多数正凡人的血清中有低效价冷凝集素，但效价一般不超过1:16，且在20℃时凝集即可消失。本例患者由于病理变化，血清中出现高效价冷凝集素抗-I，在37℃还能与自身RBC发生明显凝集，使血型鉴定出现误判，并影响交叉配血。 碰到此种情况应该留意：①血型鉴定时先用37℃盐水洗涤被检RBC 2～3次，以消除冷凝集素造成的鉴定错误。②交叉配血时，次侧RBC也应该用37℃盐水洗3次，主侧血清先做自家吸收试验吸收冷凝集素，以防冷凝集素造成的配血困难。③冷凝集素效价太高时，提高室温25℃～30℃下反应是行之有效的方法。;(3)类B 现象：; ;三. 交叉配血（Crossmatching）;;接收申请单和血标本;交叉配血的要求;试验方法;盐水介质凝集试验;盐水介质凝集试验; 试验记录 4+（++++）：一个大凝集块，背景透明，无游离细胞 3+（+++）：数个大凝集块，背景透明，无游离细胞 2+（++）：许多小凝集块，背景稍混浊，有游离细胞 1+（+）：细小的凝集块，背景浑浊 W+（±）：极细小凝集块，要用显微镜观察结果 0（-）：无凝集，无溶血，细胞呈游离散在状态 PH：部分溶血 H：完全溶血;试管法结果判定;盐水介质凝集试验;酶介质凝集试验;酶介质凝集试验;优点： 成本低，快速。 缺点：（1）破坏某些抗原（如MN，Duffy） （2）酶批次不同，活性不同，难以标 准化。 （3）需确定最适孵育时间，处理过度 则会降解IgG。 （4）假阳性高。 应用：现已少用，主要用于ABO新生儿溶血病 检查，Rh抗体筛检。 ;用于测定在体外能引起红细胞致敏的抗体。 用不完全抗体测定红细胞血型，如Rh血型。 交叉配血。 ;第一阶段 致敏阶段 ;抗球蛋白试剂不纯; 优点：经典，特异（金标准），可测补体致 敏，受冷凝集素影响相对少。 缺点：烦琐（需两次三洗），孵育时间长，不适用于急诊和血库存的大批量工作。且易受残留血清蛋白影响。 注意事项：每次试验要设有阴性和阳性对照；实验器材清洁；注意抗原抗体比例、孵育时间、温度等条件，严格按照实验方法操作；排除自身抗体干扰 ;低离子聚凝胺技术;1 红细胞间有一定间距 2 加入聚凝胺后，可以缩短红细胞之间的距离，使其非特异性凝集 3 加入枸橼酸钠，可