第六章 色谱分析方法导论.ppt

气相色谱仪分析流程示意图（5-2） 1-载气钢瓶；2-减压阀；3-净化干燥管；4-针形阀；5-流量计；6-压力表；7-进样器；8-色谱柱；9-检测器；10-放大器；11-温度控制器；12-记录仪 第六章 色谱分析法概论 6.1 概述 6.2 色谱过程与术语 6.3 色谱分离的基本理论 6.4 基本类型色谱法的分离机制 6.5 色谱法的发展趋势 6.1概述6.1.1色谱法的起源和发展 1906年，俄国植物学家 M.Tswett 发表了他的实验结果：为了分离植物色素，他将含有植物色素的石油醚提取液倒入装有碳酸钙粉末的玻璃管中，并用石油醚自上而下淋洗，由于不同的色素在碳酸钙颗粒表面的吸附力不同，随着淋洗的进行，不同色素向下移动的速度不同，从而形成一圈圈不同颜色的色带，使各色素成分得到了分离。他将这种分离方法命名为色谱法(chromatography)。在此后的20多年里，几乎无人问津这一技术。到了1931年，Kuhn 等用同样的方法成功地分离了胡萝卜素和叶黄素，从此色谱法开始为人们所重视，相继出现了各种色谱方法。 7.1概述7.1.1色谱法的起源和发展 1906，俄国植物学家 M.Tswett 发明色谱法，色谱之父 1931，对液固吸附色谱的杰出贡献者库恩，分离出60多种胡萝卜素，核黄素、维生素，获1938年诺贝尔化学奖 蒂塞利乌斯(Tiselius)因电泳分析和分析方法的研究，发现血清蛋白组分，获1948年诺贝尔化学奖 1941，马丁(Martin)和辛格(Synge)创始分配色谱特别是纸色谱而共获1952年诺贝尔化学奖 氨基酸自动分析仪发明人S.穆尔(Stanford Moore)和W.H.斯坦(William Howard Stein),定量分析方法解决了有关氨基酸、多肽、蛋白质等复杂的生物化学问题，获1972年诺贝尔化学奖 6.1概述 6.1.2色谱法的定义与分类 6.1概述 6.1.2色谱法的定义与分类 1.按两相分子的聚集状态分类 2. 按固定相的固定方式分类 6.2色谱过程与术语 6.2.1色谱过程 6.2.2基本术语 6.2色谱过程与术语6.2.1色谱过程 色谱过程是物质分子在相对运动的两相间分配平衡的过程。在混合物中，若两个组分的分配系数不等，则被流动相携带移动的速率不等，即形成差速迁移而被分离。如图所示。 6.2色谱过程与术语6.2.1色谱过程 色谱过程的实质 (1)色谱过程是吸附与解析的过程； (2)不同组分极性的差异导致吸附与解析的差异； (3)不同组分向前移动的过程是差异不断累积过程，是在动态中由量变到质变的过程。 6.2色谱过程与术语6.2.2基本术语 1.色谱 2.保留值 3.分配系数(K)和容量因子(k) 4.分离参数 6.2色谱过程与术语6.2.2基本术语1.色谱 1. 关于色谱峰的术语——示意图 6.2色谱过程与术语6.2.2基本术语1.色谱 2）峰高（h）和峰面积 ：色谱峰顶点与基线的距离叫峰高。色谱峰与峰底基线所围成区域的面积叫峰面积。 6.2色谱过程与术语6.2.2基本术语2.保留值 保留值 a. 死时间(t0) ：不与固定相作用的物质从进样到出现峰极大值时的时间，它与色谱柱的空隙体积成正比。由于该物质不与固定相作用，因此，其流速与流动相的流速相近。据 t0 可求出流动相平均流速 b. 保留时间tr：试样从进样到出现峰极大值时的时间。它包括组份随流动相通过柱子的时间t0和组份在固定相中滞留的时间。 f. 调整保留体积 ：某组份的保留体积扣除死体积后的体积。 g. 相对保留值r2,1：组份2的调整保留值与组份1的调整保留值之比。 区域宽度通常有三种表示方法： 标准偏差?：峰高0.607 倍处峰宽处的一半。 半峰宽W1/2：峰高一半处的峰宽。W1/2=2.354 ? 峰底宽W：色谱峰两侧拐点上切线与基线的交点间的距离。W= 4? 6.2色谱过程与术语6.2.2基本术语3.分配系数(K)和容量因子(k) 6.2色谱过程与术语6.2.2基本术语3.分配系数(K)和容量因子(k) 6.2色谱过程与术语6.2.2基本术语4.分离参数 6.2色谱过程与术语6.2.2基本术语4.分离参数 色谱分析的目的就是要将混合物中的各组分分离，为了获得较好的准确度，一般规定两相邻峰的分离度 Rs≥1.5时，可认为两组分完全分离。 6.3色谱分离的基本理论 6.3.1 分配系数与保留行为的关系 6.3.2 等温线 6.3.3 塔板理论 6.3.4 速率理论 6.3.5 影响分离度的因素 6.3色谱分离的基本理论6.3.1分配系数与保留行为的关系 6.3色谱分离的基本理论6.3.2等温线 6.3色谱分离的基本理论6.3.2等温线 对称因子：