苏丹红Ⅲ对泥鳅的生物毒性探究.pdf

BIOLOGICAL TOXICITYOF SUDANRED工工ITO MISGURNUS ANGUILLICAUDATUS ADissertationSubmittedto theGraduateSch001ofHenanNormal University inPartialFulfillmentofthe Requirements forthe of Degree MasterofScience By WangJun ie Zhongj Supervisor：Prof．Chang April，2013 摘要 当代社会，在人们生活水平提高的同时，人们越来越重视周围环境安全以及自身生 活质量。WHO提出21世纪的食品安全、环境安全是一个世界性的挑战。因此环境中存 在的，对人们生活环境和质量造成或可能造成影响的众多因素的研究日益受重视，其中 食品添加剂就是重点研究的内容之一。近年来，苏丹红引发的食品污染，使人们开始关 注新的人工合成色素的危害。 本研究根据评价外源物质毒性作用的毒理学标准，通过毒理学和分子生物学的研究 方法，初步分析和研究了苏丹红IⅡ对泥鳅成体的急性毒性影响、遗传毒性影响、生理毒 性影响以及对泥鳅成体的基因组DNA损伤作用和cDNA表达水平的影响。此外，还研 究了苏丹红III对泥鳅胚胎发育时期的毒性影响。本研究整体地分析了苏丹红ⅡI对泥鳅的 毒性作用，为进一步深度研究苏丹红Ⅲ的毒性提供了有效的依据，对于评估非食品添加 剂对人类生活健康安全的影响具有深远和现实的意义。总体研究结果如下： 一定剂量的苏丹红III对泥鳅具有强烈的毒性作用，这是对苏丹红III毒性的初步认识，对 其更深一步了解还需后续实验的具体分析。 2．遗传毒性实验是在急性毒性实验的基础上，设定浓度梯度，以红细胞中的微核率 为指标，进一步研究苏丹红III对泥鳅的染色体异常的影响。共设六个浓度组： 连续处理五天时间，统计结果表明：苏丹红III能诱导泥鳅红细胞产生微核，对泥鳅染色 体异常的影响具有时间一剂量效应。 酶的酶活力变化为指标，进一步探究苏丹红III对泥鳅生理水平上的毒性影响。结果发现， 苏丹红III能诱使泥鳅肝脏中的这两种酶活力不同程度地降低，而且处理浓度越高、处理 时间越长，下降的程度越明显。可见，苏丹红III对泥鳅的生理功能具有明显的毒性作用。 T 对泥鳅基因组和表达水平上的毒性影响，结果显示：在DNA和RNA水平上均有新条带 的出现、正常条带的消失以及条带明暗变化的现象，不同浓度以及不同处理时间表现出 不同程度的变化，表明苏丹红III对泥鳅的基因组DNA和肝脏中的RNA均有不同程度的 毒性作用，能够诱发泥鳅基因组的突变和基因表达水平的变化。此外，本研究还对筛选 出的特异条带进行回收、克隆测序和序列分析，在RNA水平上发现与免疫相关的表达 基因，这些研究结果对于揭示苏丹红毒性的分子机制具有重要的参考意义。 5．胚胎毒性实验是以胚胎的孵化率和畸形率为指标，分别从胚胎发育的四个时期 (胚胎隆起期、原肠胚中期、神经胚期、尾芽期)开始处理，结果表明：苏丹红III能够不 同程度地诱使泥鳅的胚胎孵化率降低、畸形率升高，对泥鳅胚胎具有一定的致死、致畸 O．0399／L、O．0499／L，可见不同发育期的胚胎敏感程度存在差异。 综合以上实验结果表明，苏丹红III是一种毒性较强的化学染料，具有较强的急性毒