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生物化学技术实验部分(2010版); 生物化学研究的核心任务： 阐明生命现象的分子机理。;生物大分子物质制备的基本过程：;;一、蛋白质的性质：;二、分离纯化蛋白质的主要方法;有机溶剂沉淀法 ;;有机溶液沉淀法的优缺点;常用的有机溶剂;用有机溶剂沉淀法时应注意的问题 ;温度的控制;pH值的选择;离子强度的选择;分离溶液浓度的控制;及时处理沉淀物;（二）、根据 分子大小和形状的差异分离;施以一定的压力使小分子溶质通过一半透膜，而按半透膜的筛孔大小截留相应的蛋白质分子;沉降的速度与颗粒的大小和密度有关。离心后按其沉降的速度不同，彼此分开形成区带。再进行光学定位，针刺或冰冻切片采样分析;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;凝胶过滤层析的原理: 介质：交联葡聚糖（Sephadex）; 聚丙烯酰胺凝胶（ Bio-Gel P ，） 琼脂糖凝胶（Sepharose，Bio-Gel A）;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;支持物的选择：;（三） 根据电荷性质的差异分离 1、电泳和等电聚焦法： 普通电泳、等电聚焦、双向电泳、脉冲电泳、毛细管电泳 支持物： PAGE 、琼脂糖胶等;Polyacrylamide Gel Electrophoresis (PAGE);Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Isoelectric Focusing relies on the migration of charged proteins in an electric field;等电聚焦法;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.; 2、离子交换层析法 基质：纤维素、交联葡聚糖、树脂;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.; （四） 配体亲和力的差异 ： 亲和层析 利用生物大分子能和其配体（例： 酶和抑制剂，抗原和抗体，激素和受体）通过次级键专一性结合，而在一定的条件下又可解离的原理进行层析的方法。 用这种层析方法，一次可将物质提得很纯，是一种专门用于分离生物大分子的层析方法。;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;■ 亲和层析作用机理：;亲和吸附剂的制备;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;;（五）HPLC（high performance/pressure liquid chromatography) ;纯化方案的评价 ;亲和层析纯化胰蛋白酶;胰蛋白酶的制备;胰蛋白酶的性质 ; 胰蛋白酶在pH3.0时最为稳定，低于此pH时酶易变性； 当高于pH5.0以上时，酶易自溶而会失去活性。 提取制备胰蛋白酶的全部过程中应注意溶液的pH值以及在冷室（0一5℃）中进行操作为宜。;胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物的胰脏中。 胰蛋白酶原先正常生理条件下，可