非发酵菌的鉴定.docVIP

非发酵菌的鉴定 定义：非发酵菌（nonfermenters）指一群需氧或兼性厌氧、不发酵糖类，能在普通培养基上生长的革兰阴性杆菌。主要存在外界环境中，种类繁多，多为条件致病菌或医院内感染菌。 关于临床标本中NFB的意义，在混合培养物中见到时，必须考虑到患者的情况和标本来源。一般来说，以纯培养方式分离自正常无菌部位的NFB，一定要鉴定到种并进行抗生素敏感性试验。 目前CLSI中，K-B法除了假单胞菌属、不动杆菌属、嗜麦芽窄食单胞菌和洋葱伯克霍尔德菌有抗生素敏感性实验的判断标准外，其他非发酵菌没有K-B法的标准。 一、鉴定原则： 血、无菌部位（脑脊液、胸水等），特殊病人，少见菌可用API-20NE或VIKET TWO-GN 卡鉴定。 其它部位如呼吸道标本、临床常见的非发酵，根据菌落形态、生化反应、抗生素耐药谱等综合分析手工法鉴定即可。 二、非发酵性菌基本分类： 假单胞菌属 Pseudomonas spp.（20多个临床上重要菌种中，铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌等最常见。） 不动杆菌属 Acinetoacter spp.（最常分离的种鲍曼不动杆菌、鲁氏不动杆菌、溶血不动杆菌等） 窄食单胞菌 Stenotrophomonas spp.（嗜麦芽窄食单胞菌、非洲嗜麦芽窄食单胞菌） 伯克霍尔德菌 Burkholderia spp.（洋葱伯克霍尔德菌、唐菖蒲伯克霍尔德菌、类鼻疽伯克霍尔德菌等） 鞘氨醇单胞菌属 Sphingomonas spp.（少动鞘氨醇杆菌） 无色杆菌属 Achromobacter spp.（木糖氧化无色杆菌） 希瓦氏菌属 Shewanella spp. （腐败希瓦氏菌 海藻希瓦氏菌） 产硷菌属 Alcaligenes spp. 黄杆菌属 Flavoacterium spp. 莫拉菌属 Moraxella spp. 罗尔斯菌Ralstonia spp. 食酸菌属 Acidovorax spp. 丛毛单胞菌属 Comamonas spp. 甲基杆菌属 Methylobacterium spp. 等还有一些未定名的菌群 三、辨认非发酵菌的基本要点 1. 分离培养基上的菌落有以下情况初步考虑非发酵菌的存在 a.培养基上生长较差或中国蓝上不生长的阴性菌。（如艾肯菌属、心杆菌属、金氏杆菌属） b.中国蓝平板上为不发酵乳糖的菌落，氧化酶阳性的高度怀疑非发酵菌。但并非所有的氧化酶阳性的均为非发酵菌。如弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属、巴斯德菌属等。 c.革兰阴性菌在三糖管上培养，底层和斜面均不变色，疑为非发酵菌。但容易受影响。 2. 葡萄糖的利用 大部分非发酵菌生长缓慢产生弱酸，而蛋白胨形成的产物即可升高培养基的PH值，中和非发酵菌产生的弱酸性产物。根据他的代谢特点，用氧化-发酵培养基鉴别分类该类菌。 附：氧化-发酵葡萄糖培养基（O-F培养基）配方 成分: 蛋白胨 0.8g 氯化钠 2.0g 三水磷酸氢二钾 0.15g 葡萄糖 4.0g 琼脂 1.1g 蒸馏水 400.0ml 方法: 热溶, 调PH7.1, 加入1%溴麝香草酚兰酒精溶液1.2ml分装, 8磅15分钟, 备用. *（O-F培养基）蛋白胨与糖类比为0.2：1 实验室中根据氧化发酵葡萄糖的情况 发酵葡萄糖 发酵菌 肠杆菌科 弧菌科 非发酵菌 氧化型 非氧化型 3．动力：鉴别分类的依据 动力阳性的非发酵菌主要有： 假单胞菌属、窄食单胞菌、伯克霍尔德菌、无色杆菌属、希瓦氏菌属、产硷菌属、鞘氨醇单胞菌属（18-22℃）甲基杆菌属等 动力阴性的非发酵菌主要有： 不动杆菌属、黄杆菌属、莫拉菌属等 4．氧化酶试验：细胞色素氧化酶的产生与否鉴别分类 氧化酶试验阳性的非发酵菌主要有：假单胞菌属、伯克霍尔德菌、无色杆菌属、希瓦氏菌属、黄杆菌属、莫拉菌属等 氧化酶试验阴性的非发酵菌主要有：不动杆菌属 、窄食单胞菌等 5．在中国兰上生长能力：一般在35℃24小时生长良好，但有些需要35℃24小时后在室温或30℃继续培养24小时。 6.色素：（常见菌） 产黄色素的有：洋葱伯克霍尔德菌、唐菖蒲伯克霍尔德菌、嗜麦芽窄食单胞菌、金黄杆菌属、少动鞘氨醇单胞菌属等； 产蓝绿色素的有：Pae 产荧光色素的有：Pae、恶臭假单胞菌、荧光假单胞菌； 产紫色色素的有：紫色色杆菌 产红棕色或淡紫色的有：腐败希瓦