α-GalCer活化的自然杀伤T细胞对高危角膜移植后排斥反应的防治作用.pdfVIP

·209· ·实验研究· eL．GalCer活化的自然杀伤T细胞对高危角膜 移植后排斥反应的防治作用 宫妍 宋丽艳孙海成 【摘要】 背景 角膜移植排斥反应是导致角膜移植手术失败的主要原因，抑制角膜移植排斥反应的各 种药物均有不良反应。研究发现自然杀伤T(NKT)细胞可致器官移植患者免疫耐受，但目前有关NKT细胞 用于治疗高危角膜移植免疫反应的研究较少。 目的 探讨体外ot-GalCer活化的NKT细胞在防治大鼠高危 角膜移植免疫排斥反应中的作用。 方法 无菌条件下取Lewis大鼠脾脏淋巴细胞．加入质量浓度为 100 mg／L的ot—GalCer，在RPMI1640培养基培养I周后，流式细胞仪分选出NKT细胞(密度为5×106个／m1)。 取lO只Fisher 344大鼠为供体，20只Lewis大鼠为受体。受体角膜移植前1周角膜缝线诱导角膜新生血管 (CNV)。将受体大鼠按照随机数字表法随机分为NKT细胞组和生理盐水组，每组各IO只。Lewis大鼠行穿 ml 透角膜移植。NKT细胞组在手术结束时球后注射0．1NKT细胞液，生理盐水组注射相同体积的生理盐水。 术后裂隙灯下观察记录角膜植片的反应情况并按照Holland的标准进行评分。术后第14天，两组各获取3只 大鼠角膜植片行组织病理学检测，采用免疫组织化学法检测角膜植片中CD4+和CD8+T淋巴细胞的浸润情 况。结果 生理盐水组角膜植片平均存活时间为(7。90+1．37)d，NKT细胞组为(14．70±1．49)d，差异有统计 学意义(t=10．61，P=0．00)。术后2周，生理盐水组角膜植片重度混浊水肿，大量炎性细胞浸润．新生血管长 人植片，而NKT细胞组角膜植片仅轻度混浊、水肿，炎性细胞明显少于生理盐水组。免疫组织化学检测可见， 生理盐水组角膜植片中大量CD4+和CD8+T淋巴细胞浸润，NKT细胞组中CD4+和CD8+T淋巴细胞明显减少。 流式细胞仪检查结果表明，NKT细胞组大鼠脾脏中NKT细胞百分数为(5．67±0．25)％．明显高于生理盐水组 的(1．2l±O．19)％。差异有统计学意义(t=8．43．P=0．00)。结论口一GalCer活化的NKT细胞球后注射可以 明显延长大鼠高危角膜移植植片的存活时间，为角膜移植排斥反应的防治提供了新的手段。 【关键词J 自然杀伤T细胞；高危角膜移植；细胞治疗 Effectof naturalkillerTcellonsurvivalof with afterretro- a·GalCer-activated allograft rejection high-risk bubar GONG Central injection Yan，SONGLi—yan，SUNHal—cheng．Departmentof0phthalmology，Laiyang Hospital。Yantai265200，China author：GONG Corresponding Yon，Email：gongyan265200@sina．corn Corneal isa causeofcorneal transplantation 【Abstract】Backgroundgraftreject major failure．Although havebeenutilizedtoreducethe adverseeffectson and manyimmune-suppressingdru