选择性阻断异常Wnt信号通路对肝癌细胞生长及侵袭的影响.pdfVIP

复 里学报 (医学版) 146 Fudan UnivJ Med Sci 选择性阻断异常Wnt信号通路对 肝癌细胞生长及侵袭的影响 江 颖’ 周信达 刘银坤。黄晓武 孙瑞霞 张春晖 陆维祺 朱 隽 罗文杰 张 华 (复旦大学附属 中山医院普外科 上海 200032；江苏省南通大学附属医院普外科 南通 226001； 。复旦大学肝癌研究所 上海 200032) 【摘要】 目的 构建T细胞转录因子(Tef)反义RNA真核表达载体 以阻断异常wnt信号通路，探讨其对肝癌 细胞生物学特性的影响。方法 利用 GeneJammer将反义基 因转染人肝癌细胞系 SMMC-7721，应用 RT-PCR 及 Westernblot方法分别检测转染前后细胞 mRNA及蛋 白表达差异，通过生长 曲线、Transwell小室实验 比较 转染细胞生长增殖及运动侵袭能力，并进一步用流式细胞仪检测细胞凋亡及生长周期的改变。结果 反义 RNA转染降低了Tcf表达，减慢了肝癌细胞的生长速度并抑止其运动侵袭能力。转染反义 RNA的肝癌细胞 7721一pTas凋亡比例增加[(26．34±2．07) ]，明显高于空载体转染细胞 7721一vector[(6．53±1．02) ]和亲本 SMMC-7721细胞[(4．33±0．68) ](P0．001)。同时，处于 Go—G 期的反义转染细胞 比相应亲本 SMMC一 7721细胞和转染空载体的细胞 7721一vector分别高20．24 和 20．95 ，而 S期细胞比亲本细胞 SMMC一7721和 7721一vector细胞分别低 11．8 和 11．38％。结论 反义TcfRNA转染可通过诱导细胞凋亡和阻止细胞周期的 进程而抑制肝癌细胞的恶性增殖 ，提示选择性阻断异常wnt信号通路有望成为肝癌基 因治疗的新途径 。 【关键词】 T淋 巴细胞 ； 肝细胞癌； 反义核糖核酸 ； 转染 【中图分类号】 R735．7 【文献标志码】 A SelectiveblockageofabnormalWntpathwayinhibitsthegrowthand invasionofhepatocarcinomacells JIANG Ying ，ZHOU Xin—da ，LIU Yin—kun。，HUANG Xiao—wu ，SUN Rui—xia。， ZHANGChun—hui。，LUWei—qi，ZHUJun ，LUOWen_jie，ZHANG Hua’ (’DepartmentofGeneralSurgery，ZhongshanHospital，FudanUniversity，Shanghai200032，China；Departmentof GeneralSurgery，AffiliatedHospitalofNantongUniversity，Nantong226001，JiangsuProvince，China； LiverCancerInstitute，FudanUniversity，Shanghai200032，China) [Abstract] Objective ToconstructtherecombinantexpressionvectorencodingantisenseTcffragmentfor theblockageofabnormalWntpathway．andtoinvestigateitseffectonthebiologica1behaviorsofhuman hepatocarcinomacells． Methods Antisenseexpressionvectorwastransfectedintohepatocarcinomacells SMMC-7721wit