钛离子对Jurkat T细胞增殖及分泌骨改建相关因子的影响.pdfVIP

· 3442 · 广东医学 2015年 11月第 36卷第 22期 GuangdongMedicalJournal Nov．2015，Vo1．36，No．22 钛离子对 JurkatT细胞增殖及分泌骨改建 相关因子的影响术 庞振华 ，陈东晖 ，李秋莹 ，张宁。，唐礼 广西医科大学附属口腔医院 种植科，牙周粘膜科 (南宁530021)；煤炭总医院口腔科 (北京 100028) 【摘要】 目的 探讨钛离子对体外培养的JurkatT细胞增殖及分泌白细胞介素1p(IL一1)、肿瘤坏死因子一 (TNF—o)【、核因子 一KB受体活化因子配体 (RANKL)的影响。方法 (1)应用噻唑蓝(M1rr)法确定对 JurkatT 细胞具有最大增殖效应的钛离子浓度和作用时间。(2)根据是否用植物血凝素(PHA)预活化将JurkatT细胞分 为PHA(+)及PHA(一)两个大组，两组细胞按加入钛离子浓度的不同分别设立低、中、高浓度组及对照组，相对 应以25、50、100 mol／L，0 moL／L的钛离子进行干预，24h后离心收集各组细胞上清液，ELISA法检测细胞上清 液中IL—lp、TNF一0【及 RANKL的表达。结果 100 moL／L的钛离子与JurkatT细胞作用24h能使之产生最大 的增殖效应，且增殖效应具有浓度依赖性，当钛离子浓度大于100~moYL时，钛离子对JurkatT细胞的效应由增殖转 为抑制。对于PHA(+)及 PHA(一)组的JurkatT细胞 ，低、中、高浓度组的钛 离子均能使之分泌 IL—lB、TNF一 及RANKL，PHA(+)组Jurk~T细胞各细胞因子的分泌量高于PHA(一)组。结论 钛离子能使体外培养的Jut- katT细胞产生增殖效应并分泌骨改建相关因子IL一1B、TNF一 及RANKL。 【关键词】 钛离子；JurkatT细胞；细胞增殖；骨改建 现今牙科种植治疗已成为牙列缺损或牙列缺失的 lympus，日本)，全 自动酶标检测仪 (iMark，美国)等。 常规修复手段。然而种植术后早期出现的种植体周围 1．1．2 实验试剂 RPMI一1640培养基及胎牛血清 骨吸收及偶发的种植体无菌性松动逐渐引起了学者们 (北京海克隆生物化学制品有限公司)，二 甲基亚砜 的关注。研究表明这一类种植体表面钛离子的释放引 (DMSO)(北京索来宝科技有 限公司)，四氯化钛 发了免疫反应进而导致 了种植体周 围骨 吸收 的出 (TiC1)溶液、植物血凝素 (PHA)及噻唑蓝 (MTT)(美 现…。免疫骨学的观点认为，免疫系统与骨细胞之间 国sigma公司)，人肿瘤坏死 因子 一 (TNF～ )、人 白 存在一定的联系，免疫细胞可以通过分泌细胞因子作 细胞介素 一1p(IL一1B)及人核因子 一KB受体活化因 用于与骨细胞，从而调节骨改建。T细胞作为主要的 子配体 (RANKL)ELISA检测试剂盒 (武汉华美生物科 免疫细胞 ，其活化后可以分泌细胞核因子 ．cB受体活化 技公司)。 因子配基体 (RANKL)、肿瘤坏死因子 一0l(TNF一仅)、 1．1．3 实验细胞 JurkatE6一lT淋 巴细胞株购 白中 白细胞介素一1p(IL一1p)等细胞因子促进破骨细胞 国医学科学院基础医学研究所协和细胞资源中心。 的分化、成熟，通过调节破骨细胞的功能来调节骨代 1．2 实验方法 谢 ]。钛和钛合金作为 口腔种植体的主要材料，植入 1．2．1 JurkatT细胞的培养 JurkatT细胞复苏后 ，加 人体后，可因口腔特殊环境因素而发生腐蚀，造成钛离 入完全 RPMI一1640培养基 中，于37cc，5％的CO：培 子析出，析出的钛离子因其本身的生物惰性 ，常以四价 养箱内孵育。每2～3天传代 1次。 离子的形式存在 。2014年6月至2015年 1月，本 1．2．2 钛离子对JurkatT细胞增殖的影响 取对数期 实验通过实验探讨钛离子对体外培养的JurkatT细胞 生长的JurkatT细胞，用RPMI一1640培养基调整细胞 增殖及分泌骨改建相关因子的影