PH对大西洋鲑蛋白酶活性的影响.pdfVIP

第 09期 (总第 376期) 吉 林 水 利 2013年 09月 [文章编号]1009—2846(2013)09—0054—03 PH对大西洋鲑蛋白酶活性的影响 杨春桥 ．张瑞雪 。 (1．长春市水产品质量安全监测 中心，吉林 长春 130033；2．吉林农业大学，吉林 长春 130118) [摘要]为 了研究pH对大西洋鲑蛋 白酶活性的影响。采用福林酚法分析研究了pH对大西洋鲑 胃、肝脏 、前 肠、中肠、后肠 中蛋 白酶活力的影响。结果表 明，在设定的pH范围内，大西洋鲑各组织蛋 白酶的活力均随着 温度和 pH 的升高呈现先升后降的变化趋势 。其 中，胃蛋 白酶最适 pH为 3．0，肝脏 7．0，其它为7．5，大西洋鲑 蛋白酶活力存在器官差异性 各组织在其最适pH下。蛋 白酶活力顺序为 胃肝脏前肠中肠后肠 各部位 间 差异显著 fP0．051。 [关键词]pH；大西洋鲑；蛋 白酶活性 ；淀粉酶活性 [中图分类号]S959 [文献标识码]B 大西洋鲑 (Salmonsalar)属鲑科 (Salmonid)鲑属 液用预冷重蒸水稀释 ．稀释至一定体积用作活性测 ftrout)的冷水性鱼类 。具有体形长 ．在较低水温环境 定 ，至于冰箱中保存 ，24h内完成所有测定。 中生长快 ，具有个体大 、体壁肉厚、肉质好 、不饱和 1．3 pH梯度设置 脂肪酸含量高等优 良特性 ．是加工生鱼片的首选 采用 0．2M的磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液 ．在 品种 大西洋鲑是重要的海产经济鱼类．也是我 国 pH5．0—8．5的范围内．以0．5pH为梯幅 ．设置 7个 重要 的海水养殖品种．但有关其消化道蛋白酶活性 pH梯幅，用以测肝脏 、前肠 、中肠和后肠 。在 pH 的系统研究 尚未见报道．该试验就 pH对大西洋鲑 2—8的范围内，以 IpH为梯幅 ．共设置 7个 pH梯 胃、肝脏 、前肠 、中肠 、后肠 中蛋白酶活力的影响进 幅，用 以测 胃。分别在各 pH条件下，测酶的活性 ， 行了研究．旨在为大西洋鲑消化生理和营养需求的 反应温度(37~11oC。 研究提供理论依据 1．4 蛋白酶活性测定 参照福林酚试剂法。在室温下，加 1％的酪蛋 1 材料与方法 白lml和不同梯度 pH 的缓冲液 4ml，加稀释后待 测酶液样 品 1ml，(28±1)℃恒 温水浴 中准确反应 1．1 试验材料 15min．加入 10％三氯 乙酸 3ml终止酶反应 ．过滤 试验用大西洋鲑采 自长春市海水养殖科技示 取滤液 lml，加 5ml0．55M 的碳酸钠溶液 ．再加 lml 范基地 。选取 5尾体质健壮 、无病无伤的大西洋 福林酚试剂于(37±1)℃恒温水浴 中显色 15min。用 鲑 ，体-~x：(28．23~3．96)em，体r~It(304．18~17．46)g。 722分光光度计 ．在波长 680nm波长下测定吸光 1．2 样品制备 度 。用酪氨酸做标准曲线 。对照管在加入酶液前 ． 试验鱼采集后暂养于水族箱 中，饥饿 24h。处 先加入三氯乙酸 3ml使酶失活．其它同样品管。 理时先测量鱼的体长及体质量 ．然后置于冰盘 中解 1．5 蛋白酶活性的定义 剖 ，分离出肝脏 、胃、肠，剔除上面的脂肪 。用双蒸水 在 pH为 7．5f胃蛋 白酶活性在pH为 2．O条件 清洗肠 、胃内的内容物，然后测其体积。分别取大西